目的 用反轉錄PCR法，調取膽囊癌細胞內的端粒酶RNA(hTR)基因，并針對其序列設計錘頭狀核酶切割基因序列，并將其構建入真核表達載體pTriEx4內。方法 根據hTR cDNA序列，設計引物，經RT-PCR法從體外培養的膽囊癌細胞內調取hTR模板區基因，根據其測序結果，合成錘頭狀核酶基因，與經相應酶切的真核表達載體連接，酶切鑒定重組體的正確性。結果經RT-PCR從細胞內調出68 bp序列，與hTR cDNA比較，與模板區域堿基序列一致。核酶基因重組子經酶切鑒定序列正確。結論 RT-PCR法可調出膽囊癌hTR基因有效片段； 成功構建了針對hTR模板區的核酶基因的真核表達載體，為膽囊癌的基因治療奠定了基礎。