目的探討多效生長因子基因(pleiotrophin,Ptn)轉染小鼠脂肪來源干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作為組織工程血管的重建種子細胞的可行性,并檢測其基因表達,為缺血性病損治療提供新手段。 方法取3只清潔級近交系C57BL/6W雌性小鼠(體重15~20 g)腹股溝皮下脂肪,采用酶消化法體外分離、培養ADSCs,流式細胞儀行細胞表面標志物CD29、CD44鑒定。實驗分為轉染pIRES2-LEGFPN1組(含Ptn基因編碼序列,A組)和轉染pLEGFP-N1負對照組(含GFP基因編碼序列,B組)。ADSCs轉染后,A組以最佳篩選濃度200 μg/mL 的G418對轉染后細胞進行篩選,流式細胞儀鑒定轉染后細胞免疫表型。實時熒光定量PCR、Western blot檢測A、B組細胞Ptn基因和PTN蛋白表達。 結果實驗成功分離、培養小鼠ADSCs;細胞表面標志物CD29、CD44陽性率分別達99.5%、95.8%,雙陽性率達93.6%。A組轉染Ptn后細胞表面標志物CD29、CD44陽性率分別達99.1%、95.6%,雙陽性率達93.4%。實時熒光定量PCR、Western blot檢測示,A組Ptn基因和PTN蛋白相對表達水平均顯著高于B組(P lt; 0.05)。 結論Ptn基因能轉染小鼠ADSCs并高表達PTN蛋白,為組織工程血管構建種子細胞選擇提供了新思路。