目的 探討應用聚乳酸聚乙醇酸(PLGA)構建組織工程心臟瓣膜的可行性. 方法 掃描電子顯微鏡觀察PLGA結構特點,將PLGA在兔皮下包埋,分別于2周、4周、6周、8周和12周觀察材料的生物相容性和降解率,培養犬主動脈瓣間質細胞、主動脈壁間質細胞和皮膚成纖維細胞,對照其生長曲線、平滑肌α肌動蛋白表達和掃描電子顯微鏡特點.將犬主動脈壁間質細胞和內皮細胞種植于PLGA上,觀察其形態并測定細胞合成膠原和前列環素的功能. 結果 PLGA呈網孔狀結構,孔徑179μm.皮下包埋顯示PLGA生物相容性好,體內降解時間為12周.犬主動脈瓣間質細胞和主動脈壁間質細胞平滑肌α肌動蛋白均為部分陽性表達,細胞內有大量粗面內質網,生長曲線相似.細胞種植顯示細胞在材料表面生長良好,并具有合成膠原和前列環素的功能(P＜0.05 ). 結論 以PLGA為支架體外構建組織工程心臟瓣膜細胞不僅能在PLGA表面生長,還能合成細胞間質和血管活性物質,初步提示應用本組材料和方法構建組織工程心臟瓣膜是可行的.
目的 研究食管上皮細胞在聚乳酸-聚乙醇酸［poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA］三維支架材料上的黏附和生長情況，探索利用組織工程技術構建組織工程食管的可行性。 方法 應用粒子浸出常溫模壓法制作PLGA三維多孔支架材料；分離培養6只犬食管上皮細胞，體外擴增后，種植到預涂Ⅳ型膠原的PLGA支架材料上。在體外和犬腹腔內分別培養食管上皮細胞-支架復合物，分期終止培養，體外培養3 d，1、2、3和4周，其中將體外培養3 d后細胞-支架復合物植入同只犬腹腔內，于體內培養1、2、3和4周后行組織學、掃描電鏡觀察，以及細胞角蛋白抗體免疫組織化學檢測。 結果 分離培養的犬原代食管上皮細胞呈鋪路石樣，體外可大量擴增，細胞角蛋白抗體免疫組織化學染色呈陽性；體外及體內培養可見食管上皮細胞在支架材料上黏附、生長良好，持續培養仍保持食管上皮細胞特性；犬腹腔內培養4周后，可形成食管黏膜樣組織。 結論 預涂Ⅳ型膠原的PLGA支架材料適合食管上皮細胞黏附生長，可作為組織工程食管的支架材料。利用組織工程的方法在體外和犬腹腔內培養有可能獲得適于移植的組織工程食管。
為對比兩種聚乳酸改性材料聚乳酸-殼聚糖（PLA-CTS）和聚乳酸-乙醇酸（PLA-PGA）的特性，本實驗分別制備PLA-CTS和PLA-PGA支架，電鏡下觀察支架形態，計算孔隙率，測定支架降解后溶液的pH值。同時培養大鼠嗅鞘細胞（OECs），分別與兩種支架混合培養，同時將單純培養的OECs做為對照組，測定并比較兩種支架上OECs的增殖力、黏附率，并在熒光鏡下觀察支架上OECs的生長情況。結果顯示，制備的PLA-CTS和PLA-PGA支架均為多孔立體結構，PLA-CTS支架孔隙率為91%，PLA-PGA支架孔隙率為87%。隨著時間延長，支架降解液的pH值逐漸下降，而PLA-PGA的下降速度要快于PLA-CTS。OECs接種到兩種支架后，大多數能在支架上生長良好，MTT檢測及熒光顯微鏡下觀察細胞核數目兩組差異無統計學意義，但PLA-CTS組的細胞黏附率要明顯高于PLA-PGA。結論表明與PLA-PGA相比，PLA-CTS可能是做為OECs支架更佳的材料。
目的評估殼聚糖-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物［poly（lactide-co-glycolide），PLGA］雙壁微球在體外持續緩釋具有生物活性的 NGF 的可行性。方法應用乳化-離子交聯方法制備包埋 NGF 的、具有不同三聚磷酸鈉（sodium tripolyphosphate，TPP）交聯濃度［1%、3%、10%（W/V）］的殼聚糖-PLGA 雙壁微球，同時制備包埋 NGF 的 PLGA 微球。通過光鏡、掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡觀察雙壁微球的表面及內部形態，并行雙壁微球的粒徑分析和紅外光譜分析。取包埋 NGF 的 PLGA 微球或 1%、3%、10%TPP 濃度交聯的包埋 NGF 的殼聚糖-PLGA 雙壁微球（分別設為 A、B、C、D 組），于不同時間點行體外微球降解率測定、微球中 NGF 緩釋率檢測；以未包埋 NGF 的殼聚糖-PLGA 雙壁微球緩釋液（設為 A1 組）作為對照，比較 A1、B、C、D 組體外微球緩釋液中 NGF 的生物活性［以緩釋液中具有陽性軸突延長反應的大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤（PC12） 細胞百分比表示］。結果包埋 NGF 的殼聚糖-PLGA 雙壁微球呈球形結構，具有相對粗糙的外表面；激光共聚焦顯微鏡觀察示 PLGA 微球均勻分布于殼聚糖-PLGA 雙壁微球內；雙壁微球的粒徑范圍為 18.5～42.7 μm；紅外光譜分析結果說明雙壁微球中殼聚糖的氨基與 TPP 中的磷酸基發生了靜電反應。體外降解率測定顯示，B、C、D 組雙壁微球降解速度明顯快于 A 組，并隨著 TPP 濃度的增加而逐漸減慢，培養各時間點各組間微球降解率比較差異均有統計學意義（P<0.05）。體外 NGF 緩釋率測定顯示，與 A 組 PLGA 微球相比，B、C、D 組雙壁微球以相對較慢的速度緩釋 NGF，且緩釋速度隨 TPP 濃度增加而減慢。除 84 d 外，各時間點 B、C、D 組間比較 NGF 總緩釋率差異均有統計學意義（P<0.05）。體外 NGF 的生物活性評估顯示，培養各時間點 B、C、D 組緩釋液中具有陽性軸突延長反應的 PC12 細胞百分比均顯著高于 A1 組（P<0.05）。培養 7、28 d，B、C、D 組間比較差異無統計學意義（P>0.05）；56、84 d 時，C、D 組緩釋液中具有陽性軸突延長反應的 PC12 細胞百分比顯著高于 B 組（P<0.05），C、D 組間差異無統計學意義（P>0.05）。結論包埋 NGF 的殼聚糖-PLGA 雙壁微球在周圍神經損傷后的再生方面具有臨床應用潛力。