目的探討Ⅱ型膠原-透明質酸（hyaluronic acid，HA）構建軟骨組織工程復合三維納米支架的可行性。 方法將Ⅱ型膠原和HA以8∶1（W∶W）比例溶于三氟乙醇和水按1∶1（V∶V）比例混合的溶劑中制成溶液，通過靜電紡絲技術制備三維多孔納米支架材料，通過光鏡和掃描電鏡觀察其表面形貌，測定其孔隙率、吸水率、表面接觸角和降解率。取1周齡日本大耳兔肋軟骨，采用酶消化法制備軟骨細胞。取第2代軟骨細胞種植于支架上，用細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）評價其細胞黏附性及增殖情況；細胞-支架復合物體外連續培養2周后，行組織學和免疫組織化學染色觀察其生物學形態及細胞外基質（extracellular matrix，ECM）分泌情況。 結果以最佳電紡液濃度為10%、接收距離為10 cm、紡絲注射速度為5 mL/h電紡獲得的支架材料，光鏡及掃描電鏡觀察示其孔隙均勻，納米纖維直徑均勻（300～600 nm），孔隙率為89.5% ± 25.0%，表面接觸角為（35.6 ± 3.4）°，24 h內支架吸水率可達1 120% ± 34%，48 d內支架降解率可達42.24% ± 1.51%。CCK-8檢測結果顯示，培養12 h細胞在支架上黏附率可達169.14% ± 11.26%，培養7 d時細胞存活率可達126.03% ± 4.54%。組織學和免疫組織化學染色示，細胞在支架上黏附增殖情況良好，可分泌ECM；細胞在支架上培養2周后，有類似于軟骨陷窩的結構形成。 結論以Ⅱ型膠原-HA制備的復合三維納米支架材料具有良好的物理性能、生物學性能和促進細胞黏附及增殖的能力，是一種良好的組織工程軟骨支架材 料。