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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"生物珊瑚支架" 1條結果
        • 不同接種方法下hBMSCs 在生物珊瑚支架中的空間分布和基因表達分析

          目的 比較采用兩種不同方法接種的hBMSCs 在生物珊瑚支架中的三維空間分布和基因表達。 方法 采用傳統接種法(A 組)和纖維蛋白凝膠接種法(B 組)構建hBMSCs 和生物珊瑚支架復合體。A 組孵育3 h,B 組孵育30 min 后檢測兩組細胞接種效率。培養后2、7、14、21 d,兩組分別取材行DAPI 染色后,熒光顯微鏡觀察,采用AxioVision 圖像分析軟件測量每個切片10 倍物鏡視野中的細胞數量,以切片的不同水平區域(從表面到底部為L1 ~ L5)和垂直區域(從中心到邊緣)比較兩組細胞分布情況;采用實時熒光RT-PCR 檢測成骨分化基因骨凝集素(osteonectin,ON)、核心結合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)和骨鈣素(osteocalcin,OC)表達。 結果 B 組細胞接種效率為88.32% ± 4.20%,明顯高于A組66.51% ± 12.33%(P lt; 0.01)。培養后2 d,兩組細胞水平區域分布由L1 ~ L4 逐漸減少(P lt; 0.05);垂直區域細胞數目比較,A 組差異無統計學意義(P gt; 0.05),B 組差異有統計學意義(P lt; 0.05);兩組間各成骨分化基因表達比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)。培養后 7 d,A 組細胞數目較2 d 時逐步減少,各水平區域間細胞數目比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05),而B 組細胞數目和各成骨分化基因表達量迅速增加,各水平區域細胞數目趨于平衡,細胞分布均勻(P gt; 0.05),ON 和Cbfα1 基因表達量明顯高于A 組,差異有統計學意義(Plt; 0.05)。培養后14 d,A 組各水平及垂直區域內的細胞數目均較7 d 時急速減少(P lt; 0.05),B 組細胞增殖良好且細胞總數與7 d 時相近;B 組OC 基因表達量達峰值,兩組間各基因表達比較差異均有統計學意義(Plt; 0.05)。培養后21 d,兩組各水平區域細胞數目和兩組間各基因表達比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05);兩組各垂直區域細胞數目比較差異均無統計學意義(Pgt; 0.05)。培養后714、21 d,B 組大部分區域細胞數目均較A 組多,差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。 結論 通過纖維蛋白凝膠接種較傳統方法接種可使hBMSCs 在支架中空間分布更均勻,能達到更快的細胞增殖和更有效的成骨分化。

          發表時間:2016-09-01 09:07 導出 下載 收藏 掃碼
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