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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"王浙明" 1條結果
        • 大鼠胰島分離純化技術的改良及活性研究

          目的 胰島的純度和活性對胰島移植治療糖尿病的療效有很大影響。探討一種大鼠胰島分離純化的新方法,以獲得高純度、高產量、活性好的胰島。 方法 選取健康成年雄性SD 大鼠10 只,體重250 ~ 300 g,逆行膽總管灌注Ⅴ型膠原酶溶液,38℃水浴消化約15 min 后,采用兩種方法純化胰島細胞:A 組采用Ficoll 400 不連續密度梯度液,B 組采用Ficoll-Paque? PLUS 溶液。行雙硫腙(dithizone,DTZ)染色鑒定胰島并計算胰島當量(islet equivalent quantity,IEQ)、胰島純度,錐蟲藍染色檢測胰島活性。取B 組胰島用海藻酸鈉- 聚左賴氨酸- 海藻酸鈉(alginate/poly-Llysine/ alginate,APA)包裹制備胰島微囊,體外靜止葡萄糖刺激胰島素釋放實驗檢測微囊化和未微囊化胰島的生物學活性。 結果 DTZ 染色示胰島呈猩紅色,有圓形、橢圓形和不規則形,胰島邊緣清晰,大部分直徑為50 ~ 300 μm。A、B組IEQ 值分別為338.04 ± 76.61 和834.80 ± 54.00,比較差異有統計學意義(P lt; 0.05)。A、B 組胰島純度分別為88.31% ± 2.67% 和95.63% ± 1.96%,差異無統計學意義(P gt; 0.05)。A、B 組胰島活率分別為67.40% ± 5.15% 和86.05% ± 2.52%,差異有統計學意義(P lt; 0.05)。胰島APA 微囊囊形呈完整圓形,大小均勻,微囊直徑為1.5 ~ 2.0 mm,每個微囊中包裹1 ~ 3 個胰島。葡萄糖刺激釋放胰島素實驗顯示,未微囊化胰島和微囊化胰島在低糖下的胰島素分泌濃度分別為(5.53 ±1.64) ng/ mL 和(4.76 ± 0.26)ng/mL,高糖下分別為(11.95 ± 2.07)ng/mL 和(14.34 ± 3.18)ng/mL,高糖刺激下胰島素釋放量為低糖刺激的2 倍多,差異有統計學意義(P lt; 0.05);兩組的刺激指數分別為2.16 ± 0.30 和3.01 ± 0.59,差異無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論 Ficoll-Paque? PLUS 溶液作為純化液分離純化胰島的方法具有操作簡便、胰島產量高、純度高等優點,獲得的胰島經微囊化或未微囊化體外培養均有良好活性。

          發表時間:2016-08-31 05:47 導出 下載 收藏 掃碼
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