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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"王德春" 1條結果
        • 重組腺相關病毒2 介導hTGF-β1 基因體內轉染兔退變髓核細胞對蛋白多糖含量的影響

          目的 應用重組腺相關病毒2(recombinant adeno-associated virus 2,rAAV2)介導hTGF-β1 基因體內轉染兔退變椎間盤髓核細胞,觀察基因產物的表達及其對退變髓核細胞蛋白多糖合成的生物調節作用。 方法 于24 只成年新西蘭大白兔,雌雄不限,體重1.7 ~ 2.2 kg,L1、2、L2、3、L3、4、L4、5 椎間盤注射25 μL 濃度為1 mmol/L 的纖維結合素片段(fibronectin fragment,Fn-f)制備椎間盤退變模型,注射Fn-f 4 周時的造模椎間盤模擬早期退變的椎間盤。將24 只兔隨機分為3 組(n=8),A、B、C 組分別于造模椎間盤髓核內注射25 μL rAAV2-hTGF-β1(1 × 1012 vg/mL)、rAAV2- 增強綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP,rAAV2-EGFP)、PBS。術后1 周A、C 組各處死2 只兔,取髓核組織采用免疫組織化學染色觀察hTGF-β1 的表達;術后4、8、12 周每組取2 只兔髓核組織,35S 整合分析法檢測新合成蛋白多糖的含量;術后12 周處死B 組2 只兔,熒光顯微鏡觀察髓核組織中EGFP 的表達。 結果 術后1 周,免疫組織化學染色示A 組髓核細胞及基質中廣泛存在強陽性染色顆粒,C 組僅存在少量陽性顆粒。35S 整合法檢測示,各時間點A 組35S 蛋白多糖合成率均高于B、C 組,比較差異有統計學意義(P lt; 0.05) ;B、C 組間比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)。術后12周, 熒光顯微鏡下觀察B 組盤髓核組織可見大量綠色熒光表達。 結論 新型基因轉導載體rAAV2 可有效介導hTGF-β1基因體內轉染兔退變髓核細胞,基因產物可持續表達超過12 周,hTGF-β1 可有效促進退變髓核細胞蛋白多糖的合成。

          發表時間:2016-08-31 05:48 導出 下載 收藏 掃碼
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