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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"杜珂" 1條結果
        • 15-脂氧合酶-1基因轉移抑制小鼠視網膜新生血管的實驗研究

          目的 觀察15-脂氧合酶-1(15-LOX-1)基因轉移對氧誘導小鼠視網膜新生血管的抑制作用。 方法 7日齡C57BL/6J小鼠96只,隨機分為正常對照組、氧誘導視網膜病變(OIR)模型組、基因治療組和空白載體組。將小鼠與哺乳母鼠共同置于氧濃度為(75plusmn;2)%的氧箱內飼養5 d后轉移至正常環境中飼養5 d,建立OIR模型。小鼠出生后第12天基因治療組玻璃體腔注射攜帶增強型綠色熒光蛋白(EGFP)和小鼠15-LOX-1基因的重組腺病毒(Ad-15-LOX-1-EGFP)載體 1 mu;l;空白載體組注射等量攜帶EGFP的重組腺病毒(Ad-EGFP)載體。注射后第2天行視網膜鋪片熒光顯微鏡觀察EGFP的表達。注射后第5天行免疫熒光染色法、實時熒光定量聚合酶鏈反應和蛋白免疫印跡法檢測15-LOX-1-基因轉染視網膜的表達;視網膜鋪片觀察視網膜血管變化,測量視網膜無灌注區和新生血管的相對面積;石蠟切片蘇木精伊紅染色并計數突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核。結果 Ad-15-LOX-1-EGFP注射第2天,視網膜鋪片上觀察到EGFP的表達。免疫熒光染色結果顯示,15-LOX-1基因轉染視網膜主要表達在外叢狀層、內核層和神經節細胞層。基因治療組15-LOX-1蛋白和mRNA表達水平明顯高于OIR模型組和空白載體組,差異有統計學意義(t蛋白表達水平=22.74、24.13,tmRNA表達水平=12.51、13.40;P<0.01);基因治療組視網膜無灌注區和新生血管面積較OIR模型組和空白載體組顯著減小,差異有統計學意義(t無血管區面積=16.22、14.31,t新生血管面積=9.97、9.07;P<0.01);基因治療組中突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核與OIR模型組和空白載體組比較明顯減少,差異有統計學意義(t=14.25、11.62,P<0.01)。結論 15-LOX-1基因轉移不僅可以減少氧誘導小鼠視網膜無灌注區面積,并且對視網膜新生血管有顯著的抑制作用。

          發表時間:2016-09-02 05:22 導出 下載 收藏 掃碼
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