目的 觀察在不同培養模式下大鼠胰腺導管來源干細胞(PDSC)的生物學特性。方法 以大鼠胰腺組織為材料,采用動力性三維培養及傳統二維培養方法進行細胞培養,獲得原代PDSC,并連續傳代,純化PDSC,比較動力性三維培養及傳統二維培養細胞間連接及細胞凋亡周期的差異。結果 動力性三維培養的大鼠PDSC在培養第2天即可沿三維支架貼壁生長,在第7天即可形成細胞團,并沿三維支架多向貼壁生長; 二維培養的PDSC在培養第5天貼壁生長。三維培養與二維培養相比,二維培養的細胞間連接少見, 三維培養的細胞連接結構豐富。三維培養與二維培養相比,三維培養的G1期細胞增多,G2期細胞相對減少(P<0.01),三維培養早期自發凋亡細胞比例相對減少(P<0.05),晚期自發凋亡與壞死細胞比例兩種培養方式間的差異無統計學意義(P>0.05)。結論 動力性三維細胞培養較傳統二維細胞培養,在細胞貼壁時間、細胞連接以及細胞凋亡方面具有明顯的優勢。
目的 探討頻譜多普勒超聲檢測大鼠肝缺血/再灌注(I/R)后入肝血流量變化與血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)水平變化之間的關系。方法 Pringle 法建立肝臟缺血15min再灌注模型,應用頻譜多普勒超聲檢測再灌注后1、6及24h不同時間點肝動脈及門靜脈的入肝血流量,計算總血流量(FV),觀測肝I/R后入肝血流量的變化情況。檢測各時間點血清TNF-α及IL-1β水平的變化,分析FV與TNF-α及IL-1β之間的相關性。結果 I/R組再灌注后1及6h 的FV分別為(52.08±11.88) mL/min及(44.69±8.75) mL/min,較假手術組術后1 及6h的(85.32±29.85) mL/min和(81.41±28.67) mL/min明顯減少(P<0.05);再灌注后24hFV2組間的差異無統計學意義(P>0.05)。I/R組再灌注后1h血清TNF-α含量為(310.52±39.83) pg/mL,較假手術組術后1h的(240.74±31.65) pg/mL高(P<0.05);再灌注或手術后6 及24h的TNF-α含量2組間差異無統計學意義(P>0.05)。I/R組再灌注后1及6h血清IL-1β含量分別為(38.08±3.73) pg/mL和(27.44±6.11) pg/mL,較假手術組術后1 和6h組的(22.03±0.79) pg/mL及(21.78±0.71) pg/mL高(P<0.01, P<0.05); 再灌注后24h的血清IL-1β含量2組間差異無統計學意義(P>0.05)。FV與TNF-α及IL-1β之間存在負相關關系(r=-0.43,P<0.05;r=-0.46,P<0.05)。結論 頻譜多普勒超聲能夠通過檢測入肝血流量的變化間接判斷肝臟微循環狀態,肝I/R后入肝血流量減少,且血流量的減少可能與TNF-α和IL-1β的過表達有關。