目的建立樂伐替尼肝細胞肝癌（簡稱“肝癌”）細胞耐藥模型，以研究雙硫侖聯合銅離子對樂伐替尼耐藥細胞 Huh7 增殖和凋亡的影響。方法通過 CCK8 法檢測樂伐替尼作用下 Huh7 細胞的半抑制濃度（IC50），采用濃度遞增法誘導 Huh7 細胞樂伐替尼耐藥。各組細胞處理：對照組為 Huh7 細胞加普通培養液培養后的細胞；敏感組為 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼培養后的細胞；耐藥組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼培養后的細胞；聯合組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼+1 μmol/L 雙硫侖+0.5 μmol/L 銅離子培養后的細胞；抑制劑組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼+10 μmol/L Akt 抑制劑 MK2206 培養后的細胞。CCK8 法及流式細胞術分別檢測細胞的存活率和凋亡率；Western blot 法檢測磷酸化-Akt（p-Akt）和半胱氨酸蛋白酶 9（caspase-9）和 B 淋巴細胞瘤 2（Bcl-2）蛋白表達；Transwell 法檢測細胞侵襲性。結果樂伐替尼耐藥細胞系成功建立，選取 10、20、40、60、80 及 160 μmol/L 6 個樂伐替尼濃度對 Huh7 細胞作用 48 h 后計算得出細胞 IC50 為 12.35 μmol/L。耐藥組細胞存活率明顯高于敏感組（P<0.01），聯合組細胞存活率明顯低于耐藥組（P<0.01），抑制劑組細胞存活率明顯低于耐藥組（P<0.05）。與耐藥組比較，聯合組及抑制劑組 p-Akt 蛋白表達明顯降低（P<0.01）、caspase-9 明顯升高（P<0.01），而 Bcl-2 蛋白在耐藥組和聯合組間比較差異無統計學意義（P>0.05）。聯合組細胞凋亡率明顯高于耐藥組（P<0.01）。Transwell 結果顯示聯合組的腫瘤細胞侵襲數明顯少于耐藥組（P<0.01）。結論雙硫侖聯合銅離子能增加樂伐替尼對樂伐替尼耐藥肝癌細胞 Huh7 的敏感性，同耐藥組相比其細胞抑制率明顯提高，其機制可能與抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/Akt 通路及促進 caspase-9 蛋白表達有關。
目的探討非編碼 RNA（non-coding RNA，ncRNA）在肝細胞癌（以下簡稱“肝癌”）的增殖、遷徙和轉移中的作用及肝癌對索拉非尼耐藥的作用機制。方法查閱近年來與肝癌發病相關 ncRNA 研究的文獻，總結并歸納不同 ncRNA 與肝癌增殖、遷徙及轉移間的聯系，并從 ncRNA 層面對肝癌索拉非尼耐藥機制進行分析。結果ncRNA 種類較多，按其長短分為長鏈 ncRNA 和短鏈 ncRNA，目前研究較多的微小 RNA（miRNA）即屬于短鏈 ncRNA。通過對不同 miRNA 及長鏈 ncRNA 表達的調控，可以增強或抑制產生肝癌的信號通路，并在肝癌的診斷及治療上起到重要的指導作用，同時通過靶向調控該 ncRNA，可以逆轉肝癌索拉非尼耐藥。結論ncRNA 在肝癌的發病機制中發揮重要作用，現已成為治療肝癌的潛在靶點，通過靶向調控特定 ncRNA 的表達可以逆轉肝癌索拉非尼耐藥。
在醫學研究領域，先行性與可行性研究是為降低正式試驗的不確定性、提高正式試驗的總體質量及成功率而實施的先行性探索性試驗；先行性與可行性研究是為了回答“未來的正式試驗能否實行、是否應該實行（如果應該實行，如何實行）”這樣的問題。Ⅲ期臨床試驗耗時耗力、需大量的資源投入，所以在實施正式試驗前往往需要開展先行性探索性的小規模試驗、以確保正式試驗的可行性與順利開展。目前先行性與可行性研究越來越受到關注，然而在國內此類研究才剛引起重視。本文就先行性與可行性研究的相關概念、對正式試驗的價值、實例分析與研究現狀作簡單介紹。