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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"施克勤" 1條結果
        • 犬成肌細胞復合聚乳酸聚乙酸共聚物支架在裸鼠體內異位成軟骨的實驗研究

          目的探討與聚乳酸聚乙酸共聚物[poly(lactide-co-glycolide),PLGA]支架復合后的成肌細胞體外經軟骨來源形成蛋白2(cartilage-derived morphogenetic protein 2,CDMP-2)聯合TGF-β1誘導后,能否在裸鼠體內異位構建組織工程軟骨。 方法取1歲齡雄性比格犬股直肌肌肉分離培養成肌細胞,取第4代成肌細胞接種于PLGA支架,加入含CDMP-2與TGF-β1的軟骨誘導液體外培養2周。實驗分為4組:A組為經軟骨誘導的成肌細胞-PLGA復合物組,B組為未經軟骨誘導的成肌細胞-PLGA復合物組,C組為經軟骨誘導的單純PLGA支架組,D組為單純PLGA支架組。于24只裸鼠背部皮下兩側制備4個皮下腔隙,分別植入4組材料。術后8、12周處死裸鼠,取材行大體觀察、HE及甲苯胺藍染色、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色觀察,RT-PCR檢測Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、蛋白聚糖(Aggrecan)、Sox9 mRNA表達,阿利新藍染色檢測糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAG)含量,生物力學試驗檢測標本壓縮彈性模量。 結果A組標本術后8周呈類軟骨樣,乳白色,表面光潔,有彈性;12周時外觀和彈性與正常軟骨相似。B組術后8周僅殘余少許組織,12周已完全降解;C、D組標本術后8周均降解消失。HE染色示A組8、12周時有成熟軟骨陷窩形成;B組8周時組織內未見軟骨陷窩形成。甲苯胺藍染色示A組8、12周時組織內新生軟骨細胞形成,細胞橢圓,排列整齊,細胞陷窩形成,細胞質和細胞外基質均藍染陽性;B組8周時組織內未見藍染的細胞外基質。Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組織化學染色示A組8、12周時均呈陽性表達;B組8周時呈陰性表達。RT-PCR檢測示術后8、12周A組均可見Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、Aggrecan和Sox9 mRNA表達,B組均呈陰性。術后12周A組壓縮彈性模量為(90.79 ± 1.78) MPa,GAG含量為(10.20 ± 1.07)μg/mL與正常半月板相比,差異有統計學意義(P lt; 0.05)。 結論體外CDMP-2聯合TGF-β1軟骨誘導的比格犬成肌細胞復合PLGA支架后具備在裸鼠體內異位構建組織工程軟骨的能力。

          發表時間:2016-08-31 04:07 導出 下載 收藏 掃碼
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