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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"延胡索酰乙酰乙酸酶基因敲除" 1條結果
        • 靶向豬基因組單鏈向導RNA快速篩選以及利用圖案微陣列收獲單克隆細胞的研究

          規律性短重復回文序列簇(CRISPR)和 CRISPR 輔助蛋白 9(Cas9)構成的 CRISPR/Cas9 基因編輯技術快速推進了基因修飾豬作為醫學研究模式動物的廣泛應用。而高效的靶基因單鏈向導 RNA(sgRNA)是利用 CRISPR/Cas9 技術進行基因編輯成功的關鍵,對于豬等繁殖周期較長的大動物,則需要在實施動物實驗前,在體外篩選出高效的 sgRNA 以避免時間和資源成本浪費。另外,如何高效獲得陽性基因編輯單克隆細胞是目前尚待解決的難題。本研究建立了靶向豬基因組的 sgRNA 快速篩選方法,利用熒光載體富集基因編輯細胞,同時探索利用圖案微陣列培養技術快速獲得單克隆細胞的方法,在此基礎上高效獲得延胡索酰乙酰乙酸酶(Fah)基因編輯細胞,為后續生產作為人類肝細胞生物反應器的Fah基因敲除豬奠定基礎。

          發表時間:2021-04-21 04:23 導出 下載 收藏 掃碼
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