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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"巨邦律" 1條結果
        • 利用IDO的雙向作用重建肝移植后乙肝主動免疫的體外實驗

          目的觀察雙目的基因吲哚胺2,3二氧化酶(IDO)和乙型肝炎病毒前S抗原(HBV preS)在肝癌細胞株HepG2細胞的表達及其對人外周血淋巴細胞(PBLC)的抑制作用。方法將前期制備的重組腺病毒Ad-IDOEGFP-preS 轉染HepG2細胞,用倒置熒光顯微鏡觀察增強型綠色熒光蛋白(EGFP)的表達,RT-PCR檢測目的基因IDO和HBV preS mRNA的表達; 與人PBLC共培養,同位素標記法觀察IDO對其增殖的抑制作用。結果HepG2細胞在轉染3 d后即可見明顯的EGFP表達,7 d后熒光更強,提示目的基因已成功導入HepG2細胞。 RT-PCR顯示感染Ad-IDOEGFP-preS重組腺病毒的HepG2細胞中含有IDO和HBV preS基因片段,IDO相對表達強度為1.27,HBV preS相對表達強度為1.18,而對照組HepG2細胞未出現IDO和HBV preS基因片段。 與其共培養的淋巴細胞每分鐘放射線計數(CPM)為(7 471±1 375)次/min,明顯低于對照組CPM 〔(13 821±1 997) 次/min〕,Plt;0.001。結論重組腺病毒Ad-IDOEGFP-preS能有效地將目的基因IDO和HBV preS導入HepG2細胞并表達,攜帶該基因的HepG2細胞對PBLC的增殖具有明顯的抑制作用,這將為進一步的肝移植乙肝主動免疫動物實驗奠定基礎。

          發表時間:2016-09-08 10:45 導出 下載 收藏 掃碼
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