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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"分化" 4條結果
        • 聚乳酸/聚羥基乙酸復合骨形成蛋白修復兔關節軟骨缺損

          目的 以聚乳酸/聚羥基乙酸(poly-lactide-co-glycolide,PLGA)為載體,探討重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2, rhBMP-2)在關節軟骨修復方面的作用及可行性。方法 將PLGA制成直徑4 mm,厚3 mm的圓柱形,與rhBMP-2復合(0.5 mg/塊),制備PLGA-rhBMP-2復合物。選取2月齡新西蘭兔,抽取骨髓行原代及傳代培養,調整細胞密度為2×10.7/ml,與PLGA共培養24 h,制備PLGA細胞復合物。另取2月齡新西蘭兔72只,于雙側髕股關節股骨髁部制備直徑4 mm、深達髓腔的缺損。其中36只兔右側缺損處植入PLGA-rhBMP-2復合物,為實驗組;左側植入PLGA,為單純載體組;另36只兔左側缺損不作任何處理,為空白對照組,右側缺損處植入PLGA-細胞復合物,作為細胞組。術后4、8、12、24、36和48周取材,行大體、組織學觀察以及組織學評分。結果術后動物均存活。術后4周,實驗組和細胞組缺損內被半透明組織填充,觸之柔軟,表面較光滑,軟骨細胞周圍基質異染弱,新生軟骨厚度較正常軟骨厚;空白對照組和單純載體組未見明顯組織形成。8周,實驗組和細胞組內新生組織呈白色,半透明,質較韌,表面平整,與周圍正常軟骨界限模糊;新生軟骨細胞分布均一,但仍較正常軟骨厚,PLGA已大部分降解,僅遺留少量顆粒;單純載體組和空白對照組缺損明顯,底部形成少量白色膜狀組織。12、24周,實驗組和細胞組缺損內完全充填白色半透明新生軟骨組織,質韌,表面平整,與正常軟骨界限消失,厚度接近正常軟骨,與正常軟骨連接良好,表面細胞平行排列,深層有縱向排列的傾向,呈團狀,陷窩形成,但有別于正常軟骨細胞;單純載體組和空白對照組缺損邊緣及底部形成少量軟骨細胞,大部分為纖維組織。 36、48周,實驗組和細胞組新生軟骨組織色稍發白,表面連續,欠平整,與正常軟骨界限消失,未見滑膜增生; 新生軟骨厚度較正常軟骨薄,軟骨細胞周圍基質異染較弱;單純載體組及空白對照組缺損仍存在,但較以前縮小,基底形成纖維組織,髁部可見部分軟骨面不平整、剝脫,部分軟骨下骨外露,滑膜增厚。組織學評分,實驗組和細胞組術后12、24周分別與4、 8和48周比較,差異均有統計學意義(P<0.01);各時間點實驗組、細胞組分別與單純載體組和空白對照組比較,差異均有統計學意義(P<0.01),實驗組與細胞組在各時間點比較差異均無統計學意義(P>0.05)。結論 PLGA-rhBMP-2復合物在降解過程中釋放出rhBMP-2,rhBMP-2作用于缺損局部的骨髓基質細胞,誘導其向軟骨細胞分化,從而修復軟骨缺損;此方法簡便易行,有實用價值,有望成為治療軟骨缺損的一種新方法。

          發表時間:2016-09-01 09:20 導出 下載 收藏 掃碼
        • 重組人骨形成蛋白2與骨誘導劑對大鼠骨髓間充質干細胞增殖分化的影響

          目的 觀察重組人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP-2)與骨誘導劑對SD大鼠骨髓間充質干細胞 (mesenchymalstem cells, MSCs)的增殖與成骨作用。 方法 體外培養大鼠MSCs,分為實驗組與對照組。對照組:不加rhBMP-2與骨誘導劑。實驗組:骨誘導劑單獨作用于SD大鼠MSCs(A組);rhBMP-2分別以濃度為10(B組)、50 (C組)、100 (D組)、200 μg/L (E組)單獨作用于SD大鼠MSCs;rhBMP-2分別以濃度為10 (F組)、50 (G組)、100 (H組)、200 μg/L(I組)聯合骨誘導劑作用于SD大鼠MSCs。測定第3、6、9、12天的增殖狀況(MTT法)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨鈣素(osteocalcin,OC)水平。 結果 倒置相差顯微鏡觀察SD大鼠MSCs原代培養時,細胞接種12 h后即可貼壁;48 h細胞成梭形,形似成纖維細胞;4 d時細胞為多角形、紡錘形;6 d時,成纖維細胞散在分布,少量呈集落樣生長,為漩渦狀、放射狀排列;10 d左右,細胞基本鋪滿瓶底,融合成片。傳代細胞5~7 d即可長滿瓶底。各時間點A~I組均能顯著促進MSCs成骨活性(ALP和OC)的表達。B~E組同時具有促進MSCs 增殖作用,并呈濃度依賴性;F~I組增殖及ALP、OC含量均高于A~E組,比較差異有統計學意義(P<0.05)。 結論 rhBMP-2與骨誘導劑聯合作用可在促進MSCs增殖的同時提高其成骨活性。

          發表時間:2016-09-01 09:22 導出 下載 收藏 掃碼
        • 骨髓間充質干細胞分化為皮膚附屬器細胞的初步實驗研究

          目的 探討骨髓間充質干細胞(marrow mesenchymal stem cells, MSCs)分化為創面皮膚附屬器細胞的可能性,及其參與創面修復的可能機制。方法 無菌條件下取Wistar大鼠股骨骨髓細胞,密度梯度離心分離、純化MSCs,體外培養擴增后,用BrdU標記細胞。另于同種雄性Wistar大鼠背部正中,制備1 cm×1 cm全厚皮膚缺損創面模型,將BrdU標記的1×106/ml MSCs從陰莖靜脈輸注,術后第3天與第7天切取創面組織,行BrdU免疫組織化學單染色,以及BrdU和廣譜角蛋白免疫組織化學雙染色。結果 BrdU陽性細胞出現在創面皮下組織、皮脂腺、毛囊和骨髓腔中。免疫組織化學雙染色結果顯示,皮脂腺和毛囊有BrdU陽性細胞,同時表達廣譜角蛋白。結論 創面愈合過程中, MSCs歸巢并參與創面修復;在實驗性全身皮膚缺損創面微環境下, MSCs可分化為皮膚附屬器細胞。

          發表時間:2016-09-01 09:26 導出 下載 收藏 掃碼
        • 脂肪組織來源的基質細胞研究進展

          目的 介紹近期國內外脂肪組織來源的基質細胞研究進展。方法 廣泛查閱近期有關文獻,歸納分析此種細胞的培養和分化的研究狀況。結果 脂肪組織中存在一種多能的基質細胞,體外培養條件下這種細胞生長狀態類似成纖維細胞,可長期增殖,細胞絕大多數為中胚層來源,混有少量的血管周細胞、內皮細胞和平滑肌細胞,在一定的誘導條件下能分化為脂肪細胞、軟骨細胞、成骨細胞、成肌細胞和神經細胞。結論 脂肪組織來源的基質細胞可替代間充質干細胞作為組織工程的另一種干細胞。

          發表時間:2016-09-01 09:33 導出 下載 收藏 掃碼
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