人凝血酶調節蛋白基因對兔動脈壁的轉染_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

李敬東 ¹ , 戴毅 ¹ , 陳開 ¹ , 鄒琳 ²

1.川北醫學院附屬醫院肝膽外科（四川南充 637000）;;
2.重慶醫科大學附屬兒童醫院臨床分子醫學中心（重慶 400014）;

關鍵詞：

人凝血酶調節蛋白基因轉染動脈兔

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目的探討注射加壓轉染的方法對兔動脈壁進行人凝血酶調節蛋白（human thrombomodulin, hTM）基因轉染的可行性。
方法健康新西蘭大白兔84只，應用抽簽法隨機分為3組： pcDNA3.1/hTM質粒組（n=28），pcDNA3.1(+)/neo質粒組（n=28）和未轉染組（n=28），通過基因轉染并建立動脈損傷-阻滯模型，于術后3、7、14和28 d分別檢測hTM mRNA和蛋白在動脈壁的表達。
結果 17只實驗動物在手術當天至術后3 d內意外死亡。pcDNA3.1/hTM質粒組各時間點的hTM mRNA表達都明顯高于pcDNA3.1(+)/neo質粒組和未轉染組（P＜0.01）； pcDNA3.1(+)/neo質粒組和未轉染組組內和組間每個時間點的hTM mRNA表達比較，差異均無統計學意義（P gt;0.05）。hTM蛋白在各組中均有表達，主要位于動脈內腔面； pcDNA3.1/hTM質粒組各時間點的hTM蛋白表達明顯高于pcDNA3.1(+)/neo質粒組和未轉染組（P＜0.05）； pcDNA3.1(+)/neo質粒組和未轉染組的hTM蛋白表達在各個時間點都相對恒定，組內和組間比較差異均無統計學意義（P gt;0.05）。
結論用動脈腔內加壓法可以有效地對活體動物的動脈壁進行基因轉染。

引用本文： 李敬東,戴毅,陳開,鄒琳. 人凝血酶調節蛋白基因對兔動脈壁的轉染. 中國普外基礎與臨床雜志, 2009, 16(8): 628-632. doi: 復制

1.	戴毅，陳開，鄒琳，等. 人血栓調節蛋白基因編碼片段的克隆及在真核細胞中的表達 [Ｊ].中國普外基礎與臨床雜志， 2005; 12（6）: 577-580.
2.	戴毅，陳開，喬正榮，等. 凝血酶調節蛋白基因對臍靜脈內皮細胞抗凝功能的調控 [Ｊ]. 中華血液學雜志， 2006; 27（3）:162-165.
3.	Dulak J, Schwarzacher SP, Zwick RH, et al. Effects of local gene transfer of VEGF on neointima formation after balloon injury in hypercholesterolemic rabbits [Ｊ]. Vasc Med, 2005; 10(4): 285-291.
4.	J.薩姆布魯克， D.W.拉塞爾主編. 黃培堂主譯. 分子克隆實驗指南 [M]. 上冊. 第3版. 北京: 科學出版社， 2002: 128-129.
5.	Liu Q, Chen ZQ, Bobustuc GC, et al. Local gene transduction of cyclooxygenase-1 increases blood flow in injured atherosclerotic rabbit arteries [Ｊ]. Circulation, 2005; 111(14): 1833-1840.
6.	Forte A, Finicelli M, Mattia M, et al. Mesenchymal stem cells effectively reduce surgically induced stenosis in rat carotids [Ｊ]. J Cell Physiol, 2008; 217(3): 789-799.
7.	陳華，景在平，包俊敏，等. RNA干擾對兔血管平滑肌細胞bcl-2基因表達的影響 [Ｊ]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2007; 14（1）: 56-58.
8.	Nicklin SA, White SJ, Nicol CG, et al. In vitro and in vivo characterisation of endothelial cell selective adenoviral vectors [Ｊ]. J Gene Med, 2004; 6(3): 300-308.
9.	Kallenbach K, Salcher R, Heim A, et al. Inhibition of sm-ooth muscle cell migration and neointima formation in vein grafts by overexpression of matrix metalloproteinase-3 [Ｊ]. J Vasc Surg, 2009; 49(3): 750-758.
10.	Brunetti-Pierri N, Stapleton GE, Law M, et al. Efficient, long-term hepatic gene transfer using clinically relevant HDAd doses by balloon occlusion catheter delivery in nonhuman primates [Ｊ]. Mol Ther, 2009; 17(2): 327-333.
11.	Morishita R. Recent progress in gene therapy for cardiovascular disease [Ｊ]. Circ J, 2002; 66(12): 1077-1086.
12.	Li W, Tanaka K, Morioka K, et al. Long-term effect of gene therapy for chronic ischemic myocardium using platelet-derived endothelial cell growth factor in dogs [Ｊ]. J Gene Med, 2008; 10(4): 412-420.
13.	羅濤，張強，張建，等. 轉染單純皰疹病毒胸苷激酶基因抑制移植靜脈內膜增生 [Ｊ]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2008; 15（10）: 743-747.
14.	Wu S, Wang X, Guo L, et al. Adenovirus mediated endothelial nitric oxide synthase gene transfer prevents restenosis of vein grafts [Ｊ]. ASAIO J, 2004; 50(3): 272-277.
15.	梁宏立, 朱洪生, 黃忠耀，等. 兔自體移植靜脈基因轉移模型的建立 [Ｊ]. 上海實驗動物科學， 2000; 20（1）: 3-6.
16.	曲樂豐, 景在平, 曹貴松，等. 手術縫線攜載反義基因預防血管吻合口內膜增生的實驗研究 [Ｊ]. 中華普通外科雜志， 2002; 17（1）: 36-37.
17.	Wen DZ, Dittman WA, Ye RD, et al. Human thrombomodulin complete cDNA sequence and chromosome localization of the gene [Ｊ]. Biochemistry, 1987; 26(14): 4350-4357.
18.	Hirsch T, Spielmann M, Velander P, et al. Insulin-like gr-owth factor-1 gene therapy and cell transplantation in diabetic wounds [Ｊ]. J Gene Med, 2008; 10(11): 1247-1252.
19.	Kishida A, Nakashima M, Sakamoto N, et al. Study on complex formation between recombinant human thrombomodulin fragment and thrombin using surface plasmon resonance [Ｊ]. Am J Hematol, 2000; 63(3): 136-140.
20.	Yeh HY, Lin JC. Bioactivity and platelet adhesion study of a human thrombomodulin-immobilized nitinol surface [Ｊ]. J Biomater Sci Polym Ed, 2009; 20(5-6): 807-819.

1. 戴毅，陳開，鄒琳，等. 人血栓調節蛋白基因編碼片段的克隆及在真核細胞中的表達 [Ｊ].中國普外基礎與臨床雜志， 2005; 12（6）: 577-580.
2. 戴毅，陳開，喬正榮，等. 凝血酶調節蛋白基因對臍靜脈內皮細胞抗凝功能的調控 [Ｊ]. 中華血液學雜志， 2006; 27（3）:162-165.
3. Dulak J, Schwarzacher SP, Zwick RH, et al. Effects of local gene transfer of VEGF on neointima formation after balloon injury in hypercholesterolemic rabbits [Ｊ]. Vasc Med, 2005; 10(4): 285-291.
4. J.薩姆布魯克， D.W.拉塞爾主編. 黃培堂主譯. 分子克隆實驗指南 [M]. 上冊. 第3版. 北京: 科學出版社， 2002: 128-129.
5. Liu Q, Chen ZQ, Bobustuc GC, et al. Local gene transduction of cyclooxygenase-1 increases blood flow in injured atherosclerotic rabbit arteries [Ｊ]. Circulation, 2005; 111(14): 1833-1840.
6. Forte A, Finicelli M, Mattia M, et al. Mesenchymal stem cells effectively reduce surgically induced stenosis in rat carotids [Ｊ]. J Cell Physiol, 2008; 217(3): 789-799.
7. 陳華，景在平，包俊敏，等. RNA干擾對兔血管平滑肌細胞bcl-2基因表達的影響 [Ｊ]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2007; 14（1）: 56-58.
8. Nicklin SA, White SJ, Nicol CG, et al. In vitro and in vivo characterisation of endothelial cell selective adenoviral vectors [Ｊ]. J Gene Med, 2004; 6(3): 300-308.
9. Kallenbach K, Salcher R, Heim A, et al. Inhibition of sm-ooth muscle cell migration and neointima formation in vein grafts by overexpression of matrix metalloproteinase-3 [Ｊ]. J Vasc Surg, 2009; 49(3): 750-758.
10. Brunetti-Pierri N, Stapleton GE, Law M, et al. Efficient, long-term hepatic gene transfer using clinically relevant HDAd doses by balloon occlusion catheter delivery in nonhuman primates [Ｊ]. Mol Ther, 2009; 17(2): 327-333.
11. Morishita R. Recent progress in gene therapy for cardiovascular disease [Ｊ]. Circ J, 2002; 66(12): 1077-1086.
12. Li W, Tanaka K, Morioka K, et al. Long-term effect of gene therapy for chronic ischemic myocardium using platelet-derived endothelial cell growth factor in dogs [Ｊ]. J Gene Med, 2008; 10(4): 412-420.
13. 羅濤，張強，張建，等. 轉染單純皰疹病毒胸苷激酶基因抑制移植靜脈內膜增生 [Ｊ]. 中國普外基礎與臨床雜志， 2008; 15（10）: 743-747.
14. Wu S, Wang X, Guo L, et al. Adenovirus mediated endothelial nitric oxide synthase gene transfer prevents restenosis of vein grafts [Ｊ]. ASAIO J, 2004; 50(3): 272-277.
15. 梁宏立, 朱洪生, 黃忠耀，等. 兔自體移植靜脈基因轉移模型的建立 [Ｊ]. 上海實驗動物科學， 2000; 20（1）: 3-6.
16. 曲樂豐, 景在平, 曹貴松，等. 手術縫線攜載反義基因預防血管吻合口內膜增生的實驗研究 [Ｊ]. 中華普通外科雜志， 2002; 17（1）: 36-37.
17. Wen DZ, Dittman WA, Ye RD, et al. Human thrombomodulin complete cDNA sequence and chromosome localization of the gene [Ｊ]. Biochemistry, 1987; 26(14): 4350-4357.
18. Hirsch T, Spielmann M, Velander P, et al. Insulin-like gr-owth factor-1 gene therapy and cell transplantation in diabetic wounds [Ｊ]. J Gene Med, 2008; 10(11): 1247-1252.
19. Kishida A, Nakashima M, Sakamoto N, et al. Study on complex formation between recombinant human thrombomodulin fragment and thrombin using surface plasmon resonance [Ｊ]. Am J Hematol, 2000; 63(3): 136-140.
20. Yeh HY, Lin JC. Bioactivity and platelet adhesion study of a human thrombomodulin-immobilized nitinol surface [Ｊ]. J Biomater Sci Polym Ed, 2009; 20(5-6): 807-819.

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