目的 研究視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細胞中增生細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表達及其反義寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)對其表達和細胞增生的抑制作用,為增生性玻璃體視網膜病變(proliferative vitreoretinopathy,PVR)治療探索基因治療新途徑。 方法 (1)體外培養兔眼RPE細胞,在不同時間采用鏈霉親合素-生物素化過氧化物酶復合物(streptoavidin-biotinenzyme complex,SABC)免疫組織化學法檢測PCNA的表達;(2)脂質體介導下不同濃度的PCNA AS-ODN和正義寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)分別作用于體外培養的RPE細胞,采用免疫組織化學方法檢測PCNA的表達;(3)四唑鹽比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)檢測在不同濃度的PCNA AS-ODN和S-ODN作用下RPE細胞生長活性及其生長抑制率。 結果 (1)體外培養兔眼RPE細胞表達PCNA,表達高峰為培養后48 h ;(2)在0.28、1.12 μmol/L AS-ODN 作用下,PCNA的表達明顯受抑制;(3)0.28、1.12 μmol/L的PCNA AS-ODN 能明顯抑制RPE細胞增生活性,并呈劑量依賴性,其生長抑制率分別達53%、81%。 結論 一定濃度PCNA AS-ODN能序列特異性地抑制RPE細胞PCNA表達和增生活性,有望進一步用于PVR的治療實驗研究。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 231-233)
引用本文: 陳建斌,曾水清,徐莉莉. 增生細胞核抗原在視網膜色素上皮細胞表達及其反義寡核苷酸的抑制作用. 中華眼底病雜志, 2002, 18(3): 231-233. doi: 復制