• 510060 廣州,中山大學中山眼科中心;
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目的 構建在視網膜組織特異性表達的人血管內皮生長因子(VEGF)165基因。 方法 用聚合酶鏈反應(PCR)方法從BLAB/C鼠全基因組擴增能在視網膜組織特異性表達的rho啟動子,經限制性內切酶純化后克隆于質粒pcDNA3.1+-VEGF165中,建立重組質粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165,通過限制性內切酶酶切分析及PCR鑒定篩選出正確重組質粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165,由jetPEI介導轉染人視網膜色素上皮細胞和人臍靜脈內皮細胞,并通過免疫組織化學染色以及繪制細胞生長曲線檢測在人視網膜色素上皮細胞和人臍靜脈內皮細胞中VEGF蛋白的表達。 結果 在人視網膜色素上皮細胞中,重組質粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165比質粒pcDNA3.1+-rho-VEGF165的VEGF蛋白表達強,在人臍靜脈內皮細胞,兩者的表達量無明顯差別。 結論 pcDNA3.1+-rho-VEGF165載體的構建為進一步研究VEGF在視網膜新生血管形成中的致病機理提供基礎材料,并為進一步建立視網膜特異性表達VEGF轉基因鼠模型建立了基礎。 (中華眼底病雜志,2005,21:106-109)

引用本文: 呂秀蘭,呂林,李永浩,張靜琳,李石毅. 視網膜特異性表達人血管內皮生長因子 基因載體的構建. 中華眼底病雜志, 2005, 21(2): 106-109. doi: 復制