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目的 觀察Twist基因干擾對體外培養的猴視網膜微血管內皮細胞(RF/6A)遷移及磷酸化Akt(pAkt)蛋白表達的影響。方法 體外培養的RF/6A細胞系,并構建Twist干擾質粒和對照質粒。分為Twist干擾質粒組、陰性對照組、磷酸鹽緩沖液(PBS)組,各組應用脂質體基因轉染方法,轉入相應的質粒表達載體,采用Transwell小室法檢測發生遷移的內皮細胞并計數;鋪Matrigel膠,行內皮細胞體外成管實驗,觀察Twist基因干擾對內皮細胞成管的抑制作用;蛋白質免疫印跡檢測Twist基因干擾對RF/6A細胞pAkt蛋白表達的影響。結果 Transwell小室計數結果表明,轉染Twist干擾質粒后,遷移的細胞數顯著低于陰性對照組和PBS組(F=23.786,P=0.000)。體外成管實驗結果表明,Twist干擾質粒組內皮細胞成管數顯著低于陰性對照組和PBS組(F=7.159,P=0.014)。Twist干擾質粒組的pAkt蛋白表達明顯減少。結論 Twist基因干擾可顯著抑制視網膜微血管內皮細胞的遷移,可能機制是通過抑制pAkt蛋白的表達發揮作用。

引用本文: 張珊珊,董曉光,劉廷,陳鵬,孟麗娜. Twist基因干擾抑制猴視網膜微血管內皮細胞的遷移. 中華眼底病雜志, 2010, 26(3): 208-211. doi: 復制