目的 用蛋白質組學方法觀察 alpha;A-晶體蛋白在早期2型糖尿病大鼠神經視網膜的異常表達。方法 28 只成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為正常對照組和糖尿病組，每組14只。糖尿病組大鼠采用高脂飲食飼養聯合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)注射誘導2型糖尿病模型(T2DM)，以隨機血糖持續高于16.7 mmol/L為模型建立成功標準。對照組用常規飼料喂養，腹腔注射相同劑量枸櫞酸鈉緩沖液。成模56 d 后斷頸處死所有大鼠，剝離留存神經視網膜組織。從對照組和糖尿病組各取3只大鼠的神經視網膜組織，提取總蛋白，用二維凝膠電泳（2-DE）方法分別進行分離。應用基質輔助激光解吸電離飛行時間串聯質譜 (MALDI-TOF-MS/MS) 和肽質量指紋圖譜 (PMF) 技術對部分差異表達蛋白進行鑒定，并用蛋白免疫印跡（Western blot）和間接免疫熒光（IMF）方法對在糖尿病組表達上調的 alpha;A-晶體蛋白進行驗證。結果 平均每塊凝膠檢測到的蛋白斑點,對照組為（3122 plusmn;37），糖尿病組為（2702 plusmn;21）個。二者比較，表達水平差異有統計學意義的斑點約150個（t值均＞2.57,P值均＜0.05）。在糖尿病組表達上調68個，表達下調82個。質譜分析和數據庫檢索鑒定出 20個差異表達蛋白斑點。其中二維凝膠中2369和1048斑點在糖尿病組呈現高表達。經質譜PMF鑒定為 alpha;A-晶體蛋白。Western blot 檢測結果顯示， alpha;A-晶體蛋白在糖尿病組大鼠神經視網膜表達明顯增高。IMF 結果顯示 alpha;A-晶體蛋白在糖尿病組高表達，陽性表達主要位于視網膜的內外核層，在細胞的核周細胞漿區域有強熒光聚集。結論 alpha;A-晶體蛋白在早期2型糖尿病大鼠神經視網膜表達增高。
引用本文： 張民英,吳曉燕,王亞冬,劉慶淮. αA-晶體蛋白在2型糖尿病大鼠神經視網膜的異常表達. 中華眼底病雜志, 2010, 26(2): 160-164. doi: 復制