目的 觀察色素上皮衍生因子（PEDF）對糖尿病大鼠視網膜M uuml;ller細胞谷氨酰胺合成酶（GS）表達的影響。方法 將Sprague-Dawley大鼠分為模型組、模型對照組、PEDF干預組（干預組）、干預對照組，每組均為8只大鼠。模型組、干預組、干預對照組大鼠鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠模型。模型組大鼠不作任何干預，模型對照組為相同月齡的正常大鼠，干預組大鼠左眼玻璃體腔注射0.1 mu;g/ mu;l的PEDF 10 mu;l，干預對照組大鼠左眼玻璃體腔注射相同容積的磷酸鹽緩沖液。采用免疫組織化學法和實時熒光聚合酶鏈反應（PCR）法檢測視網膜GS和白細胞介素-1 beta;（IL-1 beta;）的表達變化。將視網膜M uuml;ller細胞置于高糖環境下培養，實驗干預組中加入100 ng/ml PEDF，空白對照組加入相同容積的培養液，24 h后通過蛋白質免疫印跡（Western blot）法和實時熒光PCR法檢測PEDF對M uuml;ller細胞GS和IL-1 beta;表達的改變。流式細胞儀錨定蛋白-異硫氰酸熒光素和碘化丙啶（Annexin V-FITC-PI）雙染色法檢測100ng/mlPEDF對高糖狀態下M uuml;ller細胞凋亡的影響。結果 實時熒光PCR法從基因水平和免疫組織化學法從蛋白質水平檢測均顯示，相對于模型對照組大鼠，模型組大鼠視網膜GS表達降低，而IL-1 beta;的表達升高，實時熒光PCR法：GS: t=4.23, P＜0.01；IL-1 beta;: t=16.73,P＜0.01；免疫組織化學法：GS:t=5.13,P＜0.01；IL-1 beta;: t=9.32, P＜0.01；干預組大鼠玻璃體腔注射PEDF 48 h后，IL-1 beta;的表達下降，GS的表達升高，與干預對照組比較，實時熒光PCR法：GS: t=3.87,P＜0.01；IL-1 beta;: t=3.61,P＜0.05；免疫組織化學法：GS:t=3.32, P＜0.05；IL-1 beta;: t=2.63, P＜0.05。在高糖環境下，通過實時熒光PCR法和Western bot 法檢測均顯示PEDF可以下調IL-1 beta;的表達，而上調GS的表達，與空白對照組比較，實時熒光PCR法：GS: t=2.89, P＜0.05；IL-1 beta;: t=3.37, P＜0.05；Western blot：GS: t=2.66, P＜0.05；IL-1 beta;: t=3.23, P＜0.05。流式細胞儀檢測結果顯示，PEDF可以抑制高糖環境下M uuml;ller細胞的凋亡，實驗組凋亡率與空白對照組凋亡率比較，差異有統計學意義(t=3.21,P＜0.05)。結論 對于糖尿病大鼠，PEDF可能通過下調視網膜M uuml;ller細胞中IL-1 beta;的表達來上調GS的表達，從而改善谷氨酸循環，抑制神經節細胞的死亡
引用本文： 沈璽,焦秦,鐘一聲,謝冰. 色素上皮衍生因子對糖尿病大鼠視網膜谷氨酰胺合成酶表達的影響. 中華眼底病雜志, 2010, 26(2): 155-159. doi: 復制