孟麗珠 1 , 陳松 2 , 劉艷 3 , 王玉川 2 , 林錦鏞 2 , 韓梅 2
  • 1. 300020 天津市眼科醫院 天津市眼科學與視覺科學重點實驗室 天津市眼科研究所 天津醫科大學眼科臨床學院［孟麗珠（研究生，現在邢臺醫專第二附屬醫院眼科）] 2. 300020 天津市眼科醫院 天津市眼科學與視覺科學重點實驗室 天津市眼科研究所 天津醫科大學眼科臨床學院 3. 300020 天津市眼科醫院 天津市眼科學與視覺科學重點實驗室 天津市眼科研究所 天津醫科大學眼科臨床學院［劉艷（研究生，現在安徽省阜陽市第二人民醫院眼科）］;
糖尿病，實驗性
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摘要 全文 圖表 參考文獻 施引文獻 補充材料

　　目的 　觀察缺氧誘導因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)特異性小干擾RNA（siRNA）對糖尿病大鼠視網膜組織中血管內皮生長因子（VEGF）mRNA表達的抑制作用。方法 　隨機對照研究。以pSilencer 2.1-U6neo 為質粒載體，構建HIF-1 alpha; siRNA 重組質粒。雄性Sprague-Dawley大鼠54只，隨機分為正常對照組和實驗組，分別為15、39只大鼠。實驗組大鼠尾靜脈注射鏈尿佐菌素（STZ）誘導建立糖尿病動物模型，再分為糖尿病模型組、空載體組和基因治療組，分別為15、12、12只大鼠。脂質體LipofectamineTM 2000介導，空載體組和基因治療組分別轉染pSilencer空載體質粒和HIF-1 alpha;siRNA 重組質粒，糖尿病模型組和正常組對照組不做轉染。采用實時逆轉錄（RT）聚合酶鏈式反應（PCR）檢測各組大鼠VEGF mRNA的表達。分別于干擾后24、48、72 h，1周時計算VEGF mRNA的抑制效率。采用單因素方差分析和LSD-t檢驗進行統計學分析。結 果　HIF-1 alpha; siRNA 重組質粒經酶切、測序鑒定，確定為目的序列。實時 RT-PCR檢測結果顯示，正常對照組僅見弱的VEGF mRNA表達，糖尿病模型組及空載體組表達明顯上調，基因治療組表達下調；各時間點空載體組與糖尿病模型組比較，差異無統計學意義（t=0.669，0.142,0.151，0.025；P=0.514，0.889，0.882，0.980)，基因治療組較糖尿病模型組及空載體組表達下調，差異有統計學意義(t=8.768、13.695、11.285、8.253，t=9.437、13.554、11.436、8.228;P值均=0.000)；VEGF mRNA抑制率24、48、72 h和1周時分別為32.76%、43.60%、47.70%、50.86%。結論 　HIF-1 alpha; siRNA 重組質粒能有效抑制糖尿病大鼠視網膜中VEGFmRNA的表達。

引用本文： 孟麗珠,陳松,劉艷,王玉川,林錦鏞,韓梅. 缺氧誘導因子-1α小干擾RNA對糖尿病大鼠視網膜血管內皮生長因子mRNA抑制作用的動態觀察. 中華眼底病雜志, 2011, 27(3): 245-249. doi: 復制