目的 觀察色素上皮衍生因子(PEDF)對糖尿病大鼠視網膜谷氨酸代謝的影響。方法 Sprague-Dawley大鼠78只,分為模型組、模型對照組、PEDF干預組(干預組)、干預對照組,實驗結束時去除血糖恢復鼠和實驗期間死亡鼠,每組以12只大鼠作為統計樣本。模型組、干預組、干預對照組大鼠采用鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠模型。模型組大鼠不作任何干預,模型對照組為相同月齡的正常大鼠。干預組大鼠左眼玻璃體腔注射0.1 mu;g/ mu;l的PEDF 5.0 mu;l,干預對照組大鼠左眼玻璃體腔注射相同容積的磷酸鹽緩沖液。采用蛋白免疫印跡法(Western bolt)和實時熒光聚合酶鏈式反應(PCR)法檢測視網膜L-谷氨酸-L-門冬氨酸轉運體(GLAST)表達的變化,高壓液相色譜法(HPLC)觀察視網膜谷氨酸的含量變化。將體外培養的大鼠視網膜M uuml;ller細胞隨機分為對照組、實驗組、PEDF干預組(干預組)和干預對照組,熒光免疫法和實時熒光PCR法檢測M uuml;ller細胞GLAST表達的改變,根據[3H]標記的D,L ndash;谷氨酸攝入量判斷M uuml;ller細胞的攝取功能。結果 實時熒光PCR法和Western bolt檢測結果顯示,相對于模型對照組大鼠,模型組大鼠視網膜GLAST表達降低 (實時熒光PCR法:t=8.86, P<0.01;Western blot:t=3.42,P<0.05),視網膜谷氨酸含量升高(t=4.01,P<0.05);干預組大鼠視網膜GLAST表達與干預對照組視網膜GLAST表達比較,干預組大鼠視網膜GLAST的表達升高(實時熒光PCR法:t=3.56,P<0.05;Western blot:t=3.52, P<0.05);視網膜谷氨酸含量下調(t=4.36, P<0.05)。實時熒光PCR法和熒光免疫法檢測結果顯示,高糖可以降低視網膜M uuml;ller細胞GLAST的表達(實時熒光PCR法:t=3.48,P<0.05;熒光免疫法:t=4.72,P<0.05);[3H]標記的D,L ndash;谷氨酸攝入量結果顯示,高糖可以下調視網膜M uuml;ller細胞GLAST的功能(t=3.81, P<0.05);經PEDF處理后,可以明顯改善高糖狀態下視網膜M uuml;ller細胞GLAST的表達(實時熒光PCR法:t=6.82, P<0.01;熒光免疫法:t=3.72,P<0.05)和對谷氨酸的攝取功能(t=4.14, P<0.05)。結論 PEDF可通過改善糖尿病大鼠視網膜M uuml;ller細胞中GLAST功能從而改善谷氨酸循環,抑制神經節細胞的死亡。
引用本文: 沈璽,焦秦,鐘一聲,謝冰. 色素上皮衍生因子對糖尿病大鼠視網膜谷氨酸代謝的影響. 中華眼底病雜志, 2011, 27(3): 226-230. doi: 復制