目的 觀察探討糖尿病(DM)大鼠視網膜組織中脯氨酰羥化酶(PHD-2)的表達及意義。方法 雄性Wistar大鼠108只,隨機分為DM模型組和正常對照組,分別為60、48只。對DM模型組大鼠進行一次性腹腔注射1%鏈脲霉素枸櫞酸(STZ)溶液建模,正常對照組腹腔注射等量的枸櫞酸緩沖液。造模后1、3、6個月,熒光顯微鏡下觀察大鼠視網膜血管分布形態。造模后1~6個月,采用伊凡思藍(EB)灌注視網膜鋪片檢測視網膜組織內EB濃度;免疫組織化學染色法觀察大鼠視網膜PHD-2陽性染色的分布特點;蛋白質免疫印跡法(Western blot)檢測大鼠視網膜中PHD-2、缺氧誘導因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)及血管內皮生長因子(VEGF)的表達。結果 熒光顯微鏡觀察結果顯示,正常對照組大鼠視網膜血管走行規則,淺深層血管形態清晰;DM模型組大鼠視網膜血管滲漏持續存在。造模后1~6個月,DM模型組大鼠視網膜血管外組織內EB含量較正常對照組明顯增加,差異有統計學意義(t=3.810,2.722,2.845,2.342,2.456,3.823;P<0.05)。免疫組織化學染色結果顯示,DM模型組及正常對照組大鼠視網膜中均可見PHD-2陽性染色,主要分布于視網膜內核層、神經節細胞層及血管壁。Western blot檢測結果顯示,DM模型組大鼠視網膜中PHD-2表達在造模后1、2個月時較正常對照組下降(t=16.230,16.390;P<0.05);HIF-1 alpha;表達在造模后1、2、3個月時較正常對照組明顯升高(t=27.073,36.709,10.176;P<0.05);VEGF表達在造模后1~6個月均較正常對照組升高(t=13.547,31.984,21.897,8.912,9.019,14.046;P<0.05)。結論 PHD-2在DM大鼠視網膜組織中有豐富表達。PHD-2 可能在糖尿病視網膜病變發生發展中有一定的調控作用,其作用途徑及機制與VEGF作用通路有關。
引用本文: 梁小玲,孫剛,陳方,周煥嬌,魏麗清,楊誠,丁運剛,張熙芳. 脯氨酰羥化酶在糖尿病大鼠視網膜的表達及其意義. 中華眼底病雜志, 2012, 28(3): 264-267. doi: 復制