目的 觀察體外分離、培養的兔羊膜成體干細胞(ADSC)定向誘導神經細胞的分化結果。方法 新西蘭雌兔羊膜分離、培養ADSC。實時定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測羊膜ADSC的纖連蛋白(Fibronectin)、巢蛋白(Nestin)、波形蛋白(Vimentin) mRNA的表達水平。單克隆形成實驗證實羊膜ADSC是否具有自我復制能力。培養成功的ADSC中加入神經分化誘導培養基誘導神經細胞分化。誘導分化5 d后,免疫熒光染色檢測 beta;-微管蛋白(tubulin)和膠質纖維酸性蛋白(GFAP)的表達。結果 培養的ADSC在24 h后逐漸從羊膜組織中移行出;72 h可見明顯的多角形細胞富集在羊膜組織周邊;120 h后多角形細胞致密地分布于羊膜四周。分裂后的子代細胞形態同父代細胞。單克隆形成實驗結果證實羊膜ADSC具有自我復制能力。實時定量PCR檢測結果顯示,羊膜ADSC的Nestin、Vimentin、Fibronectin mRNA分別是脾臟細胞同種分子表達量的15.79、1.91、7.65倍,兩者差異有統計學意義(Z=-5.243、-3.972、-2.524,P<0.05)。免疫熒光染色結果顯示, beta;-tubulin在大部分細胞的胞質中表達;GFAP在部分細胞的細胞質中表達。結論 羊膜ADSC具有自我復制能力,在合適條件下能夠分化成神經元和神經膠質細胞。
引用本文: 徐蔚,王震,曲申,劉思維,王培軍. 兔羊膜成體干細胞培養及體外定向誘導神經細胞分化. 中華眼底病雜志, 2013, 29(3): 296-299. doi: 復制