目的 觀察高糖誘導人視網膜血管內皮細胞（HRECs）脯氨酸羥化酶2(PHD2)的表達變化和對內皮細胞屏障功能的影響。方法 將培養至融合的HRECs分為三組，分別為正常對照組、甘露醇對照組與高糖組。正常對照組細胞培養液含5 mmol/L葡萄糖，甘露醇對照組細胞培養液含5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇，高糖組細胞培養液含30 mmol/L葡萄糖。培養24、48 h后收集細胞蛋白、上清液及RNA。蛋白免疫印跡法檢測細胞PHD2、缺氧誘導因子-1 alpha;（HIF-1 alpha;）及緊密連接蛋白occludin的蛋白表達水平；酶聯免疫吸附試驗檢測細胞上清液中血管內皮生長因子（VEGF）的含量；實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測細胞PHD2、HIF-1 alpha;、VEGF及occludin基因的轉錄水平；相對分子質量7 times;104的異硫氰酸熒光素標記的葡聚糖檢測細胞旁通透性。結果 與正常對照組相比，甘露醇對照組與高糖組HRECs中PHD2蛋白表達水平均先降低后升高，HIF-1 alpha;表達升高，occludin表達降低；高糖組細胞上清液中VEGF含量增加，差異均有統計學意義（PHD2：F=7.618、8.627，P＜0.05；HIF-1 alpha;： chi;2=7.692、7.652，P＜0.05；occludin：F=23.23、7.317，P＜0.05；VEGF：F=10.768、4.562，P＜0.05）。與正常對照組相比，甘露醇對照組與高糖組HRECs的PHD2、HIF-1 alpha;、VEGF及occludin基因轉錄水平升高，差異均有統計學意義（PHD2：F=5.69、14.27，P＜0.05；HIF-1 alpha;：F=6.07、10.47，P＜0.05；VEGF：F=12.31、9.14，P＜0.05；occludin：F=8.77、8.00，P＜0.05）。與正常對照組相比，甘露醇對照組與高糖組細胞旁通透性增加，差異有統計學意義（ chi;2=20.57、F=56.09，P＜0.05）。結論 高糖誘導HRECs PHD2表達發生變化。PHD2可能在內皮細胞屏障破壞中發揮一定的調控作用，其機制與HIF-1 alpha;、VEGF有關。
引用本文： 梁小玲,魏麗清,周煥嬌,孫剛,楊誠,張熙芳,楊璐,林佩蓉. 高糖誘導人視網膜血管內皮細胞脯氨酸羥化酶2表達變化和對內皮細胞屏障功能的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(1): 35-39. doi: 復制