目的 探討軟骨細胞體外培養過程中凋亡發生以及 caspase- 3的表達。 方法 采用 Annexin 和TU NEL 法檢測第 1~ 4代軟骨細胞在體外正常培養體系中第 3天和第 7天的凋亡率 ;RT- PCR和 Western blot分析caspase- 3表達水平 ;EL ISA檢測 caspase- 3蛋白酶活性。 結果 第 1~ 4代軟骨細胞在體外培養過程中均存在不同程度的凋亡現象 ,各代次軟骨細胞第 7天的凋亡率 15 .7%± 0 .3% ,明顯高于第 3天的 8.9%± 0 .6 % ,有統計學意義 (P lt;0 .0 1)。caspase- 3m RNA和蛋白質在整個培養過程中都有表達 ,隨著時間延長表達上調 ,第 7天的表達水平高于第 3天。體外培養 7天后 caspase- 3被激活 ,可檢測到分子量為 2 0 ku的裂解片段。caspase- 3蛋白酶活性隨著培養時間延長也逐漸增高 ,與細胞凋亡程度基本一致。 結論 軟骨細胞在體外培養過程中存在凋亡 ,caspase- 3參與了凋亡事件并發揮著重要作用。
引用本文: 肖娟,曹誼林,范華驊,鄒萍,崔磊,劉偉,高峰,陸華中. 體外培養軟骨細胞凋亡與caspase-3表達的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2003, 17(5): 418-421. doi: 復制