目的 探討組織工程肌腱保存過程中細胞存活率研究的方法。方法 采用碘化丙啶(PI)將第4代人成纖維細胞的死細胞染色,雙苯并咪唑染料(Ho)染色活細胞后經適當波長紫外光激發,分別產生紅色熒光和藍色熒光,利用流式細胞儀區分活細胞和死亡細胞;將組織工程化肌腱種子細胞懸液4 ml(6.0×105個/ml)平分成兩管,其中一管反復凍融,將細胞凍死;另一管不凍。再將兩管細胞按不同比例混合,采用熒光染色流式細胞儀分析,研究其量效關系;并用熒光攝影,圖像分析,即刻及2小時熒光標記到流式細胞儀,檢測對細胞存活率的影響。結果 熒光染色流式細胞分析可反映加入凍融死細胞比例與存活細胞的量效關系,即細胞存活率與未凍融細胞和凍融細胞比例分別成正、負相關,相關系數 r=0.970(P<0.05);熒光攝影后圖像分析也顯示了同樣的量效關系,r=0.982(P lt;0.05);熒光標記后2小時檢測比即刻檢測細胞存活率降低,但差異無統計學意義(P gt;0.05);通過熒光顯微鏡可直接觀察組織工程化肌腱上的細胞。結論 PI和Ho熒光染色后流式細胞儀分析及熒光攝影是組織工程肌腱保存過程中細胞存活率研究的較好方法。
引用本文: 朱肖奇,楊志明,林凡,秦廷武,鄧力,李秀群,解慧琪,羅靜聰. 組織工程肌腱保存過程中細胞存活率研究方法初步探討. 中國修復重建外科雜志, 2004, 18(2): 123-126. doi: 復制