目的 探討小鼠胚胎肝臟間充質干細胞的體外分離培養方法,并觀察其成骨分化潛能及與陶瓷化骨支架材料的復合能力。方法 將小鼠胎肝組織制成單細胞懸液行原代和傳代培養,流式細胞儀檢測其表面標志。用化學成骨誘導體系對純化的胎肝間充質干細胞行成骨誘導,并進行成骨功能檢測。將其與經過Ⅰ型膠原表面改性的陶瓷化骨復合培養,觀察細胞在其上的黏附生長情況。結果 原代培養的胎肝間充質干細胞,具有集落形成能力,為梭形或多角形,易于傳代,傳代細胞與原代細胞大小、形態相似。流式細胞儀檢測表明,傳代后的細胞CD29、CD44陽性,CD34、CD45陰性,表達間充質干細胞的特征標志。成骨誘導7 d后堿性磷酸酶染色可見有較多陽性細胞,Ⅰ型膠原免疫組織化學染色呈強陽性;14 d后,細胞堿性磷酸酶活性定量檢測明顯增高;28 d后,礦化結節染色呈陽性。將細胞與經膠原表面改性后的煅燒陶瓷化骨復合培養,掃描電鏡見載體上有大量細胞黏附于材料表面。結論 小鼠胎肝間充質干細胞易于獲取及傳代;體外成骨誘導后可向成骨細胞方向分化;能在陶瓷化骨支架材料上黏附生長。
引用本文: 王劍龍,周江南,趙自平,鄭治. 小鼠胎肝間充質干細胞的體外成骨誘導及復合陶瓷化骨的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2005, 19(8): 648-651. doi: 復制