目的 構建β淀粉樣前體蛋白裂解酶（βsite amyloid precursor protein cleaving enzyme, BACE）基因的真核表達載體，為修復阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)損傷神經元奠定基礎。方法 采用RT-PCR 方法，從人的成神經細胞瘤的總cDNA中，擴增出1.5 kb 的BACE cDNA片段，再用BamHI和XhoI雙酶切后定向克隆到真核細胞表達載體pcDNA3.1中，用限制性內切酶酶切分析和DNA序列分析鑒定重組質粒；以免疫細胞化學法檢測BACE基因的表達情況。結果 人BACE基因的cDNA已克隆到真核細胞表達載體pcDNA3.1質粒中；經脂質體轉染COS-7細胞后，并由潮霉素進行篩選，可見轉染細胞胞漿中和胞膜上有較高量的BACE蛋白表達。結論 成功構建了pcDNA3.1-BACE的真核表達載體，為研究BACE基因在AD發病機制中的作用及抑制BACE，為治療AD奠定一定的實驗基礎。
引用本文： 董煒疆,宮惠琳,馮改豐,胡海濤. 真核表達載體pcDNA3.1-β淀粉樣前體蛋白裂解酶的構建及其在COS-7細胞中瞬時表達. 中國修復重建外科雜志, 2006, 20(4): 423-426. doi: 復制