目的 探討將編碼細胞轉化生長因子β1（transfor ming gr owth factor β1，TGF-β1）的重組PGL3-TGF-β1質粒轉染兔骨髓基
質干細胞（marrow stromal stem cells，MSCs ），體外通過自分泌、誘導作用向軟骨細胞方向分化的可行性，為基因加強組織工程學修復 軟骨損傷提供體外實驗依據。 方法 兔MSCs體外密度梯度離心及貼壁篩選法分離培養，脂質體法轉染重組PGL3-TGF-β1，轉染后繪制不同時期細胞生長曲線，MTT法分析轉染后細胞(實驗組)生長活性，以未轉染空載體細胞為實驗對照組，未轉染細胞為空白對照組；轉染后第2、7天，分別進行抗TGF-β1和抗Ⅱ型膠原蛋白的免疫組織化學染色（SABC法），以未轉染細胞為實驗對照組，PBS作為一抗為空白對照組，進行圖像定量分析。 結果 MSCs體外分離培養，脂質體法轉染后，生長曲線顯示轉染后細胞生長活性較對照組降低，MTT法顯示實驗組及實驗對照組吸光度（A）值較空白對照組低，差異有統計學意義（P＜0.01）；實驗組轉染細胞第2天，抗TGF-β1免疫組織化學染色可見細胞內陽性顆粒，實驗對照組及空
白對照組均為陰性；轉染細胞第7天，抗Ⅱ型膠原免疫組織化學染色實驗組可見細胞內陽性顆粒，實驗對照組及空白對照組均為陰性。圖像分析示，實驗組抗TGF-β1及抗Ⅱ型膠原免疫組織化學染色陽性值與實驗對照組及空白對照組相比，差異均有統計學意義（P＜0.01）。 結論 脂質體法重組PGL3-TGF-β1基因可成功轉染兔MSCs，但對細胞生長有一定影響，轉染細胞表達TGF-β1，通過其自分泌、誘導作用，細胞分泌Ⅱ型膠原蛋白，表現出軟骨細胞樣生理特征，并向軟骨細胞方向分化。

引用本文： 雷磊,廖威明,盛璞義,黃綱,江麗. 重組PGL3-轉化生長因子β1基因轉染兔骨髓基質干細胞體外誘導向軟骨細胞分化的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2006, 20(2): 134-138. doi: 復制