目的 研究骨髓間充質干細胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs) 復合消旋聚乳酸(poly-L-lactic acid, PLLA)/明膠修復兔膝關節全層軟骨缺損的效果。方法 4~6月齡青紫蘭兔36只,體重2.5~3.5 kg,雌雄不拘。體外分離培養MSCs,取第2代MSCs種植于PLLA/明膠支架體外復合培養。將36只青紫蘭兔制備雙側膝關節全層軟骨缺損模型,根據修復方法不同隨機分為A、B、C 3組(n=12)。A組,將MSCs與PLLA/明膠支架材料復合物植入兔雙膝缺損處;B組,將單純PLLA/明膠支架材料植入兔雙膝缺損處;C組,缺損處不作任何處理,作為對照。A、B組在植入時均加入25 μg/L轉化生長因子β1(transforming growth factor β1, TGF-β1) 0.4 ml。分別于術后4、8和12 周,取材行大體、組織學及免疫組織化學染色觀察,并將12周大體及組織學標本按照O’driscoll等評分標準進行評分。結果 大體觀察:術后12周,A組修復組織與正常軟骨結合處完整,表面光滑,界限模糊;B、C組缺損處修復組織呈纖維組織或無修復,表面不平整或呈蟲蝕樣改變。組織學觀察:A組術后4周,細胞數較多,呈梭形、圓形或橢圓形;8周修復組織與周圍軟骨大部分結合,細胞呈圓形,以透明軟骨樣細胞為主,有軟骨陷窩,表層有梭形纖維樣細胞;12周修復組織細胞為透明軟骨樣細胞, 柱狀排列,與周圍軟骨及軟骨下骨整合良好;B組, 術后4~8周細胞數較少,細胞層次排列差;12 周修復組織菲薄,呈纖維軟骨樣,基質染色接近正常;C 組,術后4~8周缺損組織由薄層纖維組織覆蓋;12 周缺損區纖維組織進一步增厚,與周圍軟骨未結合。免疫組織化學染色顯示, A組修復組織Ⅱ型膠原染色呈陽性,B組呈弱陽性,C 組無表達。術后12 周大體觀察總評分,A、B及C組分別為2.75±0.89、4.88±1.25和7.38±1.18,A組優于B、C組, B組優于C組,且差異均有統計學意義 (P<0.05);組織學觀察總評分,A、B及C組分別為3.88±1.36、8.38±1.06和1313±1.96,A組與B、C組以及B組與C組差異均有統計學意義 (P<0.05)。結論 應用軟骨組織工程原理,以PLLA/明膠為支架材料復合自體MSCs移植是一種修復軟骨缺損行之有效的方法。
引用本文: 王覓格,夏亞一,王栓科,董平,趙琳,劉文忠,史迎賓,李延宏. 骨髓間充質干細胞復合消旋聚乳酸/明膠修復兔關節軟骨缺損的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(7): 753-758. doi: 復制