目的 探索人膠質源性神經生長因子（human glial derived neurotrophic factor，hGDNF）真核表達載體，體內直接轉染SD大鼠脊髓組織治療急性脊髓損傷(spinal cord injury, SCI)的可能性。 方法 基因重組和限制性內切酶酶切構建真核表達載體pcDNA3-hGDNF，經脂質體DOTAP介導質粒轉染SD大鼠脊髓組織，作為實驗組；對照組大鼠直接注射空載體脂質體混合物。14 d后取材，RT-PCR及Western blot檢測hGDNF mRNA及蛋白表達。 結果 重組真核表達載體pcDNA3-hGDNF經限制性內切酶Hind III和XbaⅠ酶切后，電泳顯示400 bp hGDNF目的片段和5 400 bp pcDNA3載體片段。轉染大鼠脊髓組織后14 d，RTPCR檢測出目的基因mRNA，Western blot檢測出hGDNF的蛋白表達。 結論 構建的真核表達載體pcDNA3-hGDNF能在轉染的大鼠脊髓組織中表達，可為基因治療修復急性SCI奠定基礎。
引用本文： 李琦,曾炳芳,徐建廣,孔維清. 人膠質源性神經生長因子真核表達載體構建及在大鼠脊髓組織中的表達. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(5): 482-486. doi: 復制