目的 探討雙層殼聚糖（chitosan，CS）/HAP 復合支架作為骨軟骨組織工程支架的可行性，并結合兔自體BMSCs 修復骨軟骨缺損。 方法 采用凍干法和燒結法制作雙層CS/HAP 復合支架，檢測其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4 ～ 6 mL，全骨髓培養法分離純化BMSCs，并鑒定。調整第2 代BMSCs 細胞密度為2 × 107 個/mL，應用纖維蛋白膠種植技術，接種至雙層CS/ HAP 復合支架，體外構建細胞- 支架復合物。取36 只日本大耳白兔，于右側膝關節股骨下端外側髁負重區，作一直徑4 mm、深3 mm 的圓柱形缺損，制備兔膝關節骨軟骨缺損模型。根據缺損區植入物的不同，分為A、B、C 3 組（n=12）。A 組：植入細胞- 支架復合物；B 組：植入雙層CS/HAP 復合支架；C 組：不植入任何材料，作為空白對照組。術后6、12 周取材，行大體及組織學觀察，采用改良Wakitani 法評分。 結果 雙層CS/HAP 支架CS 層孔隙率為76.00% ± 5.01%，孔徑為200 ～ 400 μm，平均300 μm，孔洞相通；HAP 層孔隙率為72.00% ± 4.23%，孔徑為200 ～ 500 μm，平均350 μm，孔洞相通，結合部結合好。全骨髓法培養BMSCs，第7 天可見集落形成，14 d 傳代；免疫組織化學檢測示CD44（+）和CD45（—）。大體觀察和組織學檢測顯示，A 組基本修復軟骨缺損，骨缺損修復不良，有骨小梁長入；B、C 組骨、軟骨缺損修復不良，組織學檢測以纖維組織或無新生組織形成，軟骨及骨缺損均明顯存在。術后6、12 周，A 組改良Wakitani 評分分別為（5.17 ± 1.17）分和（3.20 ± 0.75）分，均優于B、C 組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 雙層CS/ HAP 復合支架可作為骨軟骨組織工程支架，復合BMSCs 可修復兔關節軟骨與骨缺損，重建關節解剖結構
引用本文： 張華亮,王文良,初殿偉,劉英杰,關靜. 雙層殼聚糖與HAP 復合支架的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(11): 1358-1363. doi: 復制