• 1 北京積水潭醫院(北京,100035);;
  • 2 第四軍醫大學全軍創傷骨科研究所;;
  • 3 武警總醫院;
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【摘 要】 目的 采用海藻酸鈉凝膠(sodium alginate,A)復合異種骨的方法,構建骨組織工程載體,觀察載體中細胞的生物性能及體內成骨能力,為構建效率更高的骨組織工程載體提供實驗依據。 方法 取2 只2 周齡新西蘭兔的骨髓,以rhBMP-2(1 × 10-8 mol/L)誘導培養BMSCs。取誘導后第2 代BMSCs 接種于1%(V/W)A 中,培養4 d HE 染色觀察凝膠中細胞形態。將第2 代BMSCs 分為單純DMEM 凝膠組和含1% A 的DMEM 凝膠組,培養7 d 后行BMP-2免疫組織化學染色觀察。第2 代BMSCs 與2%(V/W)A 的DMEM 凝膠混合,負壓下復合去抗原牛松質骨(xenograftbone,X),4 d 后掃描電鏡觀察細胞生長情況。取24 只裸鼠,隨機分為2 組(n=12),于兩側股部肌袋中分別植入BMSCs-A-X 復合體作為實驗組,BMSCs-X 復合體作為對照組。于術后2、4 周后組織學觀察復合體成骨情況,圖像分析系統分析各組成骨或軟骨的面積百分比。 結果 HE 染色觀察,培養4 d A 中BMSCs 細胞形態飽滿,細胞懸浮于凝膠中,可見細胞分裂和核分裂相。單純DMEM 凝膠組和含1% A 的DMEM 凝膠組免疫組織化學觀察,細胞分裂增殖正常,伸出多種形態的突起,胞核大,核仁清晰。單純DMEM 凝膠組BMP-2 表達陽性率為44.10% ± 3.02%;含1% A 的DMEM 凝膠組為42.40% ± 4.83%,差異無統計學意義(P  gt; 0.05)。掃描電鏡觀察:A 均勻復合于X 微孔中,不同平面均有細胞生長。植入裸鼠體內2 周后,實驗組及對照組中均有軟骨和骨組織形成;實驗組軟骨面積百分比為7.31% ± 0.32%,骨為5.26% ± 0.24%;對照組軟骨為2.31% ± 0.21%,骨為2.16% ± 0.22%;兩組差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。術后4 周,兩組軟骨和新生骨小梁及骨髓組織較2 周時增多;實驗組軟骨面積百分比為9.31% ± 0.31%,骨為7.26% ± 0.26%;對照組軟骨為3.31% ± 0.26%,骨為2.26% ± 0.28%;兩組差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。術后2、4 周同組間比較差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。 結 論 以A-X 構建骨組織工程載體,符合組織工程載體的超結構原理,最大限度地承載細胞,生物性能好,對BMSCs 增殖和成骨表型及相關的生物性能無不良影響,在體內成骨效率較高。

引用本文: 孫磊,張柏青,陳磊,陶劍鋒,江健,孟國林,竇榆生,徐建強,劉丹平,胡蘊玉. 海藻酸鈉凝膠復合異種骨構建組織工程骨及體內成骨. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(6): 732-736. doi: 復制