【摘 要】 目的 通過體外培養犬BMSCs，以膠原海綿作為支架材料，體外三維復合培養后，觀察向軟骨細胞定向誘導的可行性。 方法 健康家犬10 只，體重10 ～ 15 kg，雌雄不拘。抽取骨髓，體外培養BMSCs，傳至第3 代，倒置相差顯微鏡觀察細胞形態。實驗組將第3 代BMSCs 以1×106/mL 密度接種于膠原海綿支架材料，體外培養48 h 后，將細胞材料復合物以軟骨細胞定向誘導培養基進行誘導，每隔2 天換液；對照組將第3 代BMSCs 以相同密度接種于膠原海綿支架材料，每隔2 天以DMEM 換液。培養后14 d, 將細胞材料復合物行HE 染色和免疫組織化學染色觀察。 結果 倒置相差顯微鏡下第3 代BMSCs 與第2 代BMSCs 形態基本一致，傳代初期細胞伸出偽足，呈梭形或三角形，7 d 后逐漸以梭形為主，胞體飽滿，細胞傳代后增長速度明顯加快。組織學觀察：實驗組細胞廣泛分布于支架材料孔隙內，多數細胞呈多角形或者不規則形，少數呈短梭形，細胞周圍間隙可見基質成分；對照組細胞分布于支架材料孔隙內，呈梭形或圓形，核呈圓形或橢圓形，胞體較大，胞質透亮均勻，細胞核輪廓清楚，呈藍色。免疫組織化學染色顯示，實驗組支架材料孔隙內的細胞胞漿可見棕黃色顆粒，細胞周圍出現黃染區；對照組無表達。 結論 BMSCs 接種于膠原海綿材料后，經定向軟骨
誘導后，可向軟骨組織方向分化。
引用本文： 胡煒,項舟,張學利,周海濤,楊志明. BMSCs復合膠原材料三維誘導軟骨細胞的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(2): 153-156. doi: 復制