目的 探討大鼠BMSCs 來源的成骨細胞、血管內皮細胞復合異體凍干顆粒骨的黏附性，為構建血管化組織工程骨奠定實驗基礎。 方法 取4 周齡SD 大鼠，雌雄不限，體重100 ～ 110 g，分離培養BMSCs，取生長狀態良好的第3 代BMSCs 行成骨誘導培養及成血管內皮細胞誘導培養并鑒定。將誘導7 d 的兩種細胞按1 ∶ 1 比例混合培養，作為實驗組；以生長狀態良好未誘導的第2 代BMSCs 作為對照組。培養后1 ～ 8 d 采用 MTT 法測定細胞增殖并繪制生長曲線。取誘導14 d 的兩種細胞分別按0.25 × 106、0.50 × 106、1.00 × 106、2.00 × 106、4.00 × 106 個/mL 接種于20% Col Ⅰ修飾前后的異體凍干顆粒骨（修飾組與未修飾組），接種后24 h 計算細胞黏附率。將誘導14 d 的兩種細胞按1 ∶ 1 比例混合，以總細胞密度2 × 106 個/mL 接種于修飾后異體凍干顆粒骨，掃描電鏡觀察細胞在支架上的生長情況。 結 果 BM SCs 成骨誘導7 d，ALP 染色示胞漿內可見藍染顆粒，胞核呈紅色；成血管內皮細胞誘導14 d，CD31、CD34 免疫細胞化學染色呈陽性。MTT 檢測結果顯示，實驗組細胞增殖較對照組緩慢，培養3 ～ 8 d 兩組細胞吸光度值差異有統計學意義（P lt; 0.05）。細胞接種密度為（0.25 ～ 1.00）× 106個/mL 時，兩組黏附率隨接種密度增加而上升；接種密度為1.00 × 106個/mL 時，黏附率達最高；當接種密度 gt; 2.00 × 106個/mL，黏附率明顯降低。兩組各細胞接種密度間的黏附率比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。掃描電鏡觀察顯示，體外誘導的成骨細胞與血管內皮細胞黏附于支架上仍可分化增殖，細胞胞體見絲狀偽足。 結論 大鼠BMSCs 誘導培養的成骨細胞與血管內皮細胞在20% Col Ⅰ修飾的異體凍干顆粒骨上生長狀態良好，可用于構建血管化組織工程骨。
引用本文： 陳超,李琪佳,孫瑞軍,白俊清,王志強. BMSCs 來源的成骨細胞與血管內皮細胞復合異體凍干顆粒骨的黏附性研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(9): 1129-1133. doi: 復制