目的 構建含有人腦源性神經營養因子（human brain-derived neurotrophic factor，hBDNF）的逆轉錄病毒載體pLXSN（hBDNF-pLXSN），鑒定hBDNF 生物活性。 方法 提取自愿捐獻5 月齡胎兒腦組織基因組mRNA，應用RT-PCR 技術獲得hBDNF 基因序列，體外構建hBDNF-pLXSN 感染的成纖維細胞NIH/3T3。對其進行病毒滴度檢測，采用免疫組織化學染色鑒定NIH/3T3 細胞中hBDNF 的表達。通過對PC12 細胞和大鼠背根神經節的培養，分析hBDNF 生物學活性。 結果 測序結果表明成功構建了hBDNF-pLXSN。被感染的NIH/3T3 細胞免疫組織化學染色顯示胞漿中有hBDNF 表達。hBDNF-pLXSN 具有促進PC12 細胞增殖的作用，并可以使培養的背根神經節長出神經突。 結論 hBDNF-pLXSN 病毒可以感染NIH/3T3 細胞并使其表達和分泌具有生物學活性的hBDNF，可以作為面癱基因治療研究的工具。
引用本文： 楊成,鄢榮曾,郭紅延,顧曉明. 構建含人腦源性神經營養因子基因的逆轉錄表達載體及其在成纖維細胞中的表達. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(5): 588-591. doi: 復制