• 1 軍事醫學科學院輸血醫學研究所干細胞與再生醫學研究室(北京,100850);;
  • 2 煤炭總醫院整形外科;
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目的 探討自體BMSCs 與膠原膜復合構建組織工程皮膚修復小型香豬全層皮膚缺損,為組織工程皮膚的臨床應用提供實驗依據。 方法 取4 只貴州小型香豬骨髓各20 mL 培養BMSCs,傳至第3 代。取新鮮牛肌腱通過化學交聯的方法制備成直徑為5 cm 的圓形Ⅰ型膠原膜。將密度為2 × 107 個/mL 第3 代BMSCs 用DAPI 標記后種植到Ⅰ型膠原膜上孵育24 h,制備組織工程皮膚。在豬背部正中線兩側分別由前向后切取5 個直徑5 cm、深達筋膜的圓形全層皮膚缺損創面,隨機分為兩組(n=10)。對照組行單純Ⅰ型膠原膜修復,實驗組行組織工程皮膚修復。于術后3、8 周,觀察創面愈合情況,并取材行HE 染色及透射電鏡觀察,并于術后3 周對實驗組行熒光顯微鏡及糖原染色觀察。 結 果 動物均存活至實驗完成。術后3 周對照組創面約40% 皮膚發黑、結痂、壞死,8 周時仍見壞死組織且瘢痕攣縮明顯;術后3 周實驗組創面皮膚成活,無明顯瘢痕形成,8 周創面愈合良好;兩組創面愈合率差異有統計學意義(P  lt; 0.01)。組織學觀察:術后3 周對照組可見肉芽組織增生,無表皮層覆蓋;實驗組具有良好的表皮和真皮結構,糖原染色可見基底膜呈完整連續深紅染色。術后8 周兩組均形成正常皮膚樣結構。透射電鏡觀察:術后3 周對照組真皮層有大量中性粒細胞和成纖維細胞,未見表皮超微結構;實驗組可見大量表皮細胞并以橋粒相連,表皮基底細胞與基膜以半橋粒連接;真皮層可見大量成纖維細胞,以及細胞外大量膠原微纖維沉積,可見內皮細胞形成的毛細血管。術后3 周實驗組熒光顯微鏡觀察,帶有DAPI 標記的BMSCs 定位于重建的表皮和真皮組織中,表皮主要定位于基底膜附近,真皮層可見大量熒光標記的BMSCs。 結 論 以自體BMSCs 為種子細胞與膠原膜復合構建組織工程皮膚,可有效修復豬全層皮膚缺損,有望成為一種較理想的組織工程皮膚。

引用本文: 何麗娟,劉大慶,白慈賢,閆迎軍,管利東,裴雪濤. 自體BMSCs 復合膠原膜修復豬全層皮膚缺損. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(3): 348-352. doi: 復制