目的 觀察晚期內皮祖細胞（endothelial progenitor cells，EPCs）在納米多孔PLLA 膜表面黏附、增殖的情況，為優化組織工程血管支架材料提供一種新途徑。 方法 新西蘭大白兔，體重2.5 ～ 3.0 kg，雌雄不限。取兔外周血分離和培養晚期EPCs。采用靜電紡絲技術制備納米無序纖維、有序纖維及超級有序纖維，行低溫等離子體技術改性及Ⅰ型膠原表面涂覆，制備無序膜、有序膜及超級有序膜。實驗分為A（單純細胞）、B（無序膜）、C（普通膜）、D（有序膜）、E（超級有序膜）組，將原代晚期EPCs（1 × 105 個/mL）復合至支架材料培養，3、5、7、9、11、13、15 和17 d 后MTT法檢測細胞增殖能力；實驗分A（無序膜）、B（普通膜）、C（有序膜）、D（超級有序膜）4 組，取濃度為1 × 105 個/mL 的第3 代晚期EPCs 懸液3 mL 滴加至膜上，復合培養4、12 和24 h 后沉淀法檢測細胞黏附率，1、3、7 d 測定細胞增殖率，并于復合培養后4、24、72 h 觀察細胞形態變化。 結果 納米PLLA 纖維直徑300 ～ 400 nm，孔隙率 gt; 90%。培養后3、5、7、9、11、13、15 和17 d，各組A 值均隨培養時間延長而增高，細胞生長良好；A、B 組間各時間點比較差異無統計學意義（P gt;0.05），培養后5 ～ 17 d，C、D、E 組與A、B 組間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。復合培養4 h，A 組黏附率高于B、C、D 組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；12 h 及24 h，B、C、D 組黏附率明顯高于A 組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；各組4 h 與12、24 h 比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05），12 h 與24 h 比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。復合培養1、3 和7 d，B、C、D 組增殖率明顯高于A 組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；B、C、D 組間除培養后1 d，其余各時間點比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。形態學觀察示細胞在各支架膜上生長良好，A 組及B 組細胞生長較散在、雜亂；C、D 組細胞沿纖維定向附著、伸展、增殖并分泌ECM，D 組細胞結構保持更好。 結論 納米多孔PLLA 有序膜及超級有序膜支架能促進種子細胞在材料表面黏附、增殖，并能較好保持細胞形態，是一種理想的血管組織工程支架材料；晚期EPCs 是一種理想的血管組織工程種子細胞。
引用本文： 盧輝俊,馮章啟,喬彤,劉晨,顧忠澤,劉長建. 納米多孔PLLA 膜對晚期內皮祖細胞行為的影響. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(2): 166-172. doi: 復制