• 1 中山大學附屬中山醫院整形美容外科(廣州中山,528403);;
  • 2 南方醫科大學南方醫院整形外科;
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目的 比較兩種不同肌筋膜瓣包裹脂肪來源干細胞(adipose-derived stromal cells,ADSCs)與膠原蛋白支架復合物在體內成脂效率的差異,為臨床游離脂肪組織的高效移植提供實驗依據。 方法 3 ~ 4 月齡新西蘭大白兔10 只,雌雄不限,體重2.0 ~ 2.5 kg。取兔頸部皮下脂肪組織分離ADSCs 并行原代及傳代培養,待第3 代細胞生長至瓶底70% ~ 80% 面積時,以BrdU(10 μg/mL)標記細胞48 h,行免疫熒光染色觀察;成脂誘導2 周后行油紅O 染色觀察;成骨誘導3 周后行茜素紅染色觀察;成軟骨誘導2 周后行阿利辛藍染色觀察。另取第3 代經BrdU 標記的ADSCs 成脂誘導2 周后,以1 × 107 個/ 塊接種于10 mm × 10 mm × 5 mm 大小的Col Ⅰ中,制備細胞載體復合物。實驗分為兩組,A 組由帶血管蒂的右側背闊肌筋膜瓣包裹復合物,B 組由無特定血管蒂的右側臀大肌筋膜瓣包裹復合物,每只動物均采用自體ADSCs 移植及自身對照。術后8 周取出移植物,經HE 染色和免疫組織化學染色鑒定新生組織,測定兩組新生組織的濕重和微血管數,并采用免疫熒光染色鑒定新生組織及微血管內皮細胞的來源。 結果 熒光顯微鏡下BrdU 標記為陽性的ADSCs 胞核呈綠色熒光,ADSCs 陽性標記率 gt; 90%。第3 代ADSCs 成脂誘導2 周,可見細胞內有紅色脂滴形成;成骨誘導3 周,可見紅色鈣結節樣改變;成軟骨誘導2 周,可見高度聚集生長的細胞團,阿利辛藍染色呈藍色。術后8 周取材,A 組可見血管增生并長入材料,未見明顯纖維包裹;B 組有少量血管長入材料。A 組新生組織濕重為(0.149 5 ± 0.017 3) g,B 組為(0.095 3 ± 0.012 7)g,比較差異有統計學意義(P  lt; 0.01)。HE 染色均可見移植物中有新生脂肪組織形成和不同程度微血管長入,支架材料已基本降解吸收。A 組微血管數為(31.2 ± 4.5)根,B 組為(19.3 ± 2.6)根,比較差異有統計學意義(P  lt; 0.01)。術后8 周新生組織免疫熒光染色示,A、B 組新生脂肪細胞的胞核及部分微血管內皮細胞的胞核呈綠色熒光。 結論 帶血管蒂的背闊肌筋膜瓣包裹ADSCs 與膠原蛋白支架復合物在體內的成脂效率較無特定血管蒂的臀大肌筋膜瓣高。

引用本文: 黎洪棉,高建華,魯峰,李華,陳曉煒,付冰川. 兩種不同肌筋膜瓣包裹脂肪來源干細胞載體復合物體內成脂效率的比較研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(2): 161-165. doi: 復制