目的 探討大鼠成骨細胞條件培養液對同種大鼠BMSCs 的成骨誘導分化作用，為骨組織工程種子細胞的獲得尋找一種新方法。 方法 健康1 周齡SD 大鼠10 只，雌雄不限，體重20 ～ 30 g，采用貼壁法和酶消化法分別獲得BMSCs 和成骨細胞，并進行鑒定。無菌條件收集第1 ～ 5 代成骨細胞培養液上清，與完全培養基1 ∶ 1 混合，制備成骨細胞條件培養液，與第2 代BMSCs 共培養為誘導組，相同代次BMSCs 與完全培養液共培養為對照組。倒置相差顯微鏡下觀察共培養后BMSCs 形態變化，MTT 法檢測BMSCs 生長情況，免疫組織化學染色檢測共培養后BMSCs 的ALP、Col Ⅰ、骨鈣素（osteocalcin，OCN）蛋白的表達，采用 RT-PCR 檢測Col Ⅰ、OCN mRNA 的表達。 結果 誘導組共培養7 d BMSCs 體積變大，細胞由長梭形展開為扁平形和多邊形，并帶有突起；9 d 細胞呈集落狀生長。細胞生長曲線示BMSCs 數量隨培養時間延長而增加，對照組增殖能力較誘導組強；誘導培養4 ～ 7 d，對照組細胞數量與誘導組比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。誘導組培養12 d，ALP 染色呈陽性表達；18 d 出現鈣結節；21 d Col Ⅰ和OCN 呈陽性表達；對照組均呈陰性表達。RT-PCR 檢測示誘導組培養21 d 有Col Ⅰ、OCN mRNA 表達，對照組未見表達。 結論 體外大鼠成骨細胞條件培養液有明顯的誘導同種大鼠BMSCs 向成骨樣細胞分化的作用。
引用本文： 周昆鵬,陳曉禾,常麗,李秀群,李馴虎,張玨,鄧力. 成骨細胞條件培養液對BMSCs 誘導分化作用研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(2): 145-150. doi: 復制