• 首都醫科大學宣武醫院血管外科 血管外科研究所(北京,100053);
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目的 采用簡單貼壁培養方法誘導胚胎干細胞(embryonic stem cell,ESC)分化為內皮樣細胞,為組織工程血管及細胞替代治療提供新的種子細胞。 方法 小鼠ESC 株SV129 按2 × 104 個/cm2 密度傳代培養,采用ESC培養基添加1 000 U/mL 白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factor,LIF)維持其未分化狀態。撤除LIF,ESC 懸浮培養形成擬胚體(embryoid body,EB),將培養第4 天的EB 置于含VEGF 的培養基中貼壁培養,誘導分化。采用免疫組織化學染色、流式細胞儀分析、DiI 標記的乙酰化低密度脂蛋白(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine-labeled acetylated low density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)攝取實驗以及透射電鏡檢查鑒定分化細胞的性質。 結果 分化產生的內皮樣細胞具有內皮細胞形態特征,能攝取DiI-Ac-LDL。ESC 誘導分化培養產生的第15 代細胞免疫組織化學染色呈Flk-1 和CD31 陽性;流式細胞儀檢測ESC 傳至9 代后CD31 陽性細胞 gt; 90%;透射電鏡可見懷布爾- 帕拉德體及內皮細胞間緊密連接。 結論 采用簡單貼壁培養的方法,單獨使用VEGF 即可誘導ESC 分化為內皮樣細胞。誘導培養方法操作簡便,經濟實用,可為組織工程血管及細胞替代治療提供所需內皮樣細胞

引用本文: 張斌,谷涌泉,佟鑄,楊盛家,郝立松,張淑文,汪忠鎬. 鼠胚胎干細胞誘導分化內皮樣細胞. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(1): 82-86. doi: 復制