• 蘭州大學第二醫院骨科研究所(蘭州,730030);
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目的 三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)可促進脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)的修復,通過觀察ATP 聯合BMSCs 移植治療大鼠SCI 的療效,探討兩者在SCI 修復中的協同作用及其聯合移植治療SCI 的可行性。 方法 取1 只體重120 g 的雄性SD 大鼠股骨和脛骨骨髓,分離獲得BMSCs。將第3 代BMSCs 以BrdU 標記,制備濃度為5.0 × 107 個/mL 的細胞懸液。將48 只體重240 ~ 260 g 的SD 雌性大鼠,采用改良Allen 打擊法制備T12 節段SCI 模型后,隨機分為4 組,每組12 只。聯合移植組(A 組):將ATP(40 mg/kg)與6 μL BMSCs 細胞懸液混勻后,注射至損傷脊髓撞擊中央及距頭、尾側各1 mm 處,細胞數量約3.0 × 105 個;BMSCs 移植組(B 組)、ATP 移植組(C 組)及對 照組(D 組):同A 組方法分別移植BMSCs 細胞懸液6 μL、ATP(40 mg/kg)及PBS(40 mg/kg)。術后觀察大鼠一般情況, 于 1、3、7、14、21、28 d 采用Tarlov 評分及Rivilin 斜板實驗評分評價后肢功能恢復程度;28 d 處死大鼠后取材行組織學和免疫組織化學染色觀察SCI 修復情況。 結果 術后A 組1 只,B、C 組各2 只,D 組3 只動物因感染或厭食死亡,其余動物均存活至實驗完成。各組動物術后均出現后肢癱瘓癥狀,術后2 ~ 3 周開始有不同程度恢復,A 組最快,B、C 組次之,D組最差。術后1、3 d 各組間改良Tarlov 評分和Rivilin 斜板實驗評分比較,差異無統計學意義(P  gt; 0.05);術后7、14、21、28 d 除B、C 組間比較差異無統計學意義(P  gt; 0.05)外,其余各組間比較差異均有統計學意義(P  lt; 0.05)。術后28 d 組織學觀察示,A 組大鼠SCI 處無明顯空洞,損傷區內無明顯瘢痕組織,有各種形態細胞形成,部分細胞有明顯分化特征;B、C 組SCI 處可見少量瘢痕組織填充,并有脊髓空洞形成;D 組脊髓斷端被瘢痕組織填充,可見大量炎性細胞和成纖維細胞浸潤,并有較大脊髓空洞形成。免疫組織化學染色觀察顯示,A、B 組可見存活的BrdU 標記陽性BMSCs,A 組BrdU 陽性細胞數多于B 組,比較差異有統計學意義(P  lt; 0.05);C、D 組未見BrdU 標記陽性細胞。A 組神經微絲蛋白200 和膠質纖維酸性蛋白陽性細胞面積百分比高于B、C、D 組,B、C 組高于D 組,差異均有統計學意義(P  lt; 0.05);B、C 組間比較差異無 統 計學 意義(P  gt; 0.05)。 結論 ATP 對損傷后的大鼠脊髓有保護作用,ATP 與BMSCs 聯合移植可促進其損傷脊髓修復。

引用本文: 陳永剛,王栓科,耿彬,王翠芳,趙琳,馬延超,夏亞一,劉文忠. 三磷酸腺苷聯合BMSCs 移植修復大鼠脊髓損傷的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(10): 1233-1238. doi: 復制