目的 富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)含有高濃度血小板和白細胞,這些細胞成分在機體先天性免疫防御反應中發揮著重要作用,通過評估PRP 在體內外的抑菌活性,探討其作用機制,為臨床骨感染的預防和治療提供實驗依據。 方法 取15 例健康成年志愿者外周血35 mL,采用兩次離心法制備PRP,檢測全血、PRP 以及離心后的上清液,即貧血小板血漿(platelet-poor plasma,PPP)中血小板和白細胞含量。PRP 經凝血酶激活后獲得血小板- 白細胞凝膠(platelet-leukocyte gel,PLG),將其與終濃度為1 × 106 cfu/mL 的金黃色葡萄球菌孵育,分別于2、4、6、8、12、 24 h 取樣行菌落計數,并與PRP、PPP 及PBS 比較。取36 只成年雌性新西蘭大白兔,體重(2.85 ± 0.11)kg,隨機分為4 組,PLG組(n=10)、抗生素組(n=10)、感染組(n=10)于兔右后肢脛骨髓腔內注入0.1 mL 金黃色葡萄球菌懸液(1 × 106 cfu/ mL)制備骨髓炎模型,PBS 組(n=6)單純注入PBS 代替細菌懸液作為對照。術后PLG 組即刻注入1 mL PLG;抗生素組于注入細菌懸液前1 h 靜脈注射頭孢唑啉至術后72 h(30 mg/kg),每8 小時1 次;感染組及PBS 組不予處理。術后觀察動物一般情況,于28 d 觀察期內通過X 線片、組織學和微生物學對骨感染情況進行評估。 結果 人PRP 中血小板及白細胞含量分別達全血的6.2 倍和5.5 倍,差異有統計學意義(P lt; 0.05);PPP 中血小板及白細胞含量顯著低于全血和PRP(P lt; 0.05)。體外細菌孵育結果顯示PLG 抑菌作用最明顯,細菌數量于孵育4 h 時降至最低,PRP 于6 h 后達到最低,PPP 抑菌作用不顯著且緩慢,PBS 無抑菌作用。孵育后2、4、6、8、12、24 h PLG 的細菌減少率均高于PRP 和PPP(P lt; 0.05),PRP 高于PPP(P lt; 0.05)。術后1 周PLG 組和抗生素組各1 只動物因感染死亡,其余34 只動物均存活至實驗完成。術后28 d 各組體溫、體重、紅細胞沉降率及白細胞與術前比較,差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。術后28 d PLG組、抗生素組、感染組和PBS 組的X 線骨髓炎評分分別為(2.78 ± 1.39)、(1.55 ± 1.48)、(4.17 ± 1.25)和0 分,感染組顯著高于其他各組(P lt; 0.05),PLG 組和抗生素組比較差異無統計學意義(P gt; 0.05);組織學骨髓炎評分分別為(5.89 ± 3.92)、(3.00 ± 2.31)、(10.33 ± 4.03)和0 分,感染組高于其他各組(P lt; 0.05),抗生素組低于PLG 組(P lt; 0.05)。細菌培養顯示PLG 組(44.4%)和抗生素組(20.0%)的感染發生率顯著低于感染組(88.9%),細菌定量分析顯示PLG 組和抗生素組顯著低于感染組,以上兩指標比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。 結論 PRP 被激活后形成PLG,可在體外抑制金黃色葡萄球菌的繁殖,并可有效預防兔體內骨感染的發生。
引用本文: 賈偉濤,張長青,王堅鏹,陳佳,蔣燕群. 富血小板血漿預防骨感染的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(7): 864-870. doi: 復制