目的 構建功能化組織工程骨是目前骨組織工程研究過渡到臨床應用的重要方向。通過組織工程骨的神經化構建，在體內外實驗的基礎上探討神經因素在骨組織工程中的作用。 方法 5 ～ 6 月齡健康新西蘭大白兔54只，雌雄不限，體重2 ～ 3 kg，從骨髓中分離培養BMSCs；制備兔外周感覺神經勻漿和運動神經勻漿，按1 ∶ 10（V/V）加入LG-DMEM 培養基，培養第2 代BMSCs。對照組以LG-DMEM 培養基培養。通過MTT 實驗、ALP 染色和Ⅰ型膠原免疫細胞化學染色鑒定，觀察感覺、運動神經勻漿在體外對BMSCs 增殖和成骨分化的影響。將體外經成骨誘導的BMSCs復合β 磷酸三鈣（β tricalcium phosphate，β-TCP）制備組織工程骨，植入兔體內修復15 mm 股骨與骨膜缺損。將兔隨機分為3 組，每組18 只，A 組在β-TCP 生物支架材料的側槽中植入感覺神經束，B 組植入運動神經束，C 組為單純組織工程骨；分別于術后4、8、12 周通過X 線片、骨密度檢測和免疫組織化學染色觀察神經化組織工程骨的成骨效應。 結 果 MTT法檢測示，各組吸光度（A）值隨培養時間延長均逐漸增加，從6 d 開始，感覺神經組和運動神經組的A 值均低于對照組（P lt; 0.01）；8 d 和10 d 時，感覺神經組A 值低于運動神經組（P lt; 0.05）。培養7 d 后，感覺神經組和運動神經組ALP 染色陽性細胞數均明顯少于對照組；培養14 d 后，感覺神經組和運動神經組的細胞未見Ⅰ型膠原陽性表達，對照組的細胞Ⅰ型膠原表達呈陽性。兔大段骨缺損修復區的術后X 線片及Yang 評分提示，隨著時間延長，各組Yang 評分逐步升高，8 周后A 組評分高于B、C 組（P lt; 0.01），B、C 組間差異無統計學意義（P gt; 0.05）。術后12 周骨密度檢測顯示A 組骨缺損修復良好，骨密度值高于B、C 組（P lt; 0.01），B、C 組間差異無統計學意義（P gt; 0.05）。術后12 周組織工程骨成骨局部的免疫組織化學染色顯示，S-100 在A 組表達量較高，B 組表達量較少，C 組偶見表達；降鈣素基因相關肽在A 組表達量高，B、C 組表達量較少。 結論 感覺、運動神經勻漿抑制BMSCs 增殖和成骨分化，神經化組織工程骨的成骨和塑形與感覺神經作用更為密切。
引用本文： 江汕 ,劉勇,王秋實,趙培冉,穆天旺,王簕,覃俊君,陳思圓,裴國獻. 組織工程骨神經化構建及其修復兔大段骨缺損的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(5): 599-605. doi: 復制