目的 觀察經蛛網膜下腔不同次數移植的 BMSCs 在 Wistar 大鼠損傷脊髓內的存活、遷移及對大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)修復的作用,探討 BMSCs 移植的最佳次數。? 方法 8 只 2 月齡 Wistar 大鼠,體重約120 g。取股骨骨髓體外分離培養第 2 代 BMSCs,用 Hoechst 33342 標記。另取 75 只成年 Wistar 大鼠體重約 220 g,采用改良Allen法制備T9、 10 SCI模型。隨機分為5組(n=15), A組經蛛網膜下腔置管移植1次1 × 107個/mL BMSCs懸液0.1 mL(術后 1 周), B 組 2 次(術后 1、 3 周), C 組 3 次(術后 1、 3、 5 周), D 組 5 次(術后 1、 3、 5、 7、 9 周), E 組于術后 1、 3、 5、 7、9 周各注入 0.2 mL PBS 作為空白對照。SCI 術后不同時間點行大鼠后肢 Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)評分評價神經功能狀況,并行熒光顯微鏡、 HE 染色、免疫組織化學染色觀察 BMSCs 在體內遷移、存活及分化情況。? 結果 術后 3 周,A ~ D 組 BBB 評分均有明顯增加,與 E 組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.01)。術后 7、9、12 周,C、D 組 BBB 評分均明顯高于 A、B 組(P lt; 0.01),B 組高于 A 組(P lt; 0.01)。各時間點 C、D 組間比較差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。熒光顯微鏡觀察示術后 3 周,移植的 BMSCs 存活于損傷脊髓邊緣, A 組細胞數達高峰;隨后 A 組細胞數逐漸減少, B、 C、 D 組分別于術后5、 7、 7周細胞數達高峰后逐漸下降。12周C、 D組存活細胞數顯著多于A、 B組,差異有統計學意義(P lt; 0.01);各時間點C、 D組間比較差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。 HE染色示術后3周損傷脊髓形成的空洞A、 B、 C、 D組逐漸減小,12 周 C、 D 組空洞最小, A、 B 組次之, E 組最大。免疫組織化學染色示神經絲蛋白 200(neuroflament 200, NF-200)細胞數變化趨勢與 BMSCs 存活細胞數類似。術后 12 周 NF-200 陽性細胞數在 C、D 組表達較 A、B 組明顯;神經元樣細胞發出的神經絲穿過損傷區在C、 D組最明顯, A、 B組較少。 ? 結論 多次移植BMSCs更有利于SCI修復,移植以3次為最好。
引用本文: 李輝映,文益民,羅亞麗,藍旭,汪大彬,孫振剛,胡凌云. 不同次數移植 BMSCs 修復脊髓損傷的比較研究. 中國修復重建外科雜志, 2010, 24(2): 180-184. doi: 復制