周圍神經虛擬三維重建中神經束功能及形態定位的組織化學染色方法研究_《中國修復重建外科雜志》

作者：

羅鵬 ¹ , 張毅 ² , 戚劍 ¹ , 鐘映春 ³ , 劉小林 ¹

中山大學附屬第一醫院（廣州，510080）1 顯微創傷骨科，2 整形修復外科;;
3 廣東工業大學自動化學院;

關鍵詞：

周圍神經三維重建組織化學染色紋理特征圖像分割

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目的探索周圍神經虛擬三維重建中不同性質神經纖維與功能束的組織學水平的形態學定位方法。方法取自愿捐獻新鮮成人尸體右側正中神經作為樣本進行連續冰凍切片，取形態完整標本切片30 個，首先采用單純Karnovsky-Roots 法對神經切片染色（A 組，n=30），再依次行甲苯胺藍染色（B 組，n=28）以及麗春紅2R 染色（C 組，n=21）。每種染色完成后即于光學顯微鏡下分區顯微攝影（× 100）并拼接成全景圖像，比較不同染色方法下全景圖像的紋理特征、乙酰膽堿酯酶活性部位數量及平均灰度；并對比計算機自動獲取神經束輪廓結果，以確立獲取理想圖像的染色方案。結果 A、B、C 組乙酰膽堿酯酶活性位點數量分別為（21.63 ± 4.06）× 102、（20.64 ± 3.51）× 102、（20.54 ± 5.71）× 102 個；平均灰度分別為（1.41 ± 0.06）× 102、（1.10 ± 0.05）× 102、（1.14 ± 0.07）× 102。各組間乙酰膽堿酯酶活性位點數量差異無統計學意義（F=0.64，P=0.54）；與A 組比較，B、C 組平均灰度均較低，差異有統計學意義（P lt; 0.001）。A 組僅乙酰膽堿酯酶活性部位著色；B 組髓鞘顯示不滿意；C 組可同時顯示神經纖維軸突及髓鞘染色，神經束和不同性質神經纖維紋理特征最顯著，神經束邊界輪廓最清晰，計算機處理時假陽性容易去除，圖像分割最精確。結論 Karnovsky-Roots- 甲苯胺藍- 麗春紅2R 三重復染方法不影響神經纖維乙酰膽堿酯酶陽性位點的表達，圖像紋理清晰，較符合周圍神經虛擬三維重建時在組織學水平分辨及獲取神經束功能狀態二維圖像的相關要求，有望解決周圍神經組織形態學表達方式這一技術難題。

引用本文： 羅鵬 ,張毅,戚劍,鐘映春,劉小林. 周圍神經虛擬三維重建中神經束功能及形態定位的組織化學染色方法研究. 中國修復重建外科雜志, 2012, 26(4): 477-482. doi: 復制

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