摘要： 目的 體外培養、誘導主動脈瓣膜間質細胞鈣化，并觀察其表型變化。 方法 使用膠原酶消化法從新鮮豬主動脈瓣膜上分離并體外原代培養主動脈瓣膜間質細胞，行免疫熒光染色細胞鑒定。取4~8代間質細胞，隨機分為兩組，實驗組：以含甘油磷酸、維生素C、地塞米松的鈣化培養基進行鈣化誘導培養2周；對照組：以標準培養基培養2周。在光學顯微鏡下行鈣化結節計數，茜素紅染色觀察并半定量檢測鈣沉積含量；采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）檢測間質細胞α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）及鈣化相關因子（骨鈣素、 骨橋蛋白、核心結合因子）的基因表達。 結果 從豬主動脈瓣膜上成功分離并體外培養瓣膜間質細胞，α-SMA及波形蛋白（vimentin）染色陽性，血管性血友病因子（vWF）染色陰性。間質細胞鈣化誘導培育2周可成功誘導鈣化，自發形成鈣化結節，實驗組鈣化結節(156.25±17.38個/孔vs. 2.50±1.29個/孔)和鈣沉積 (17.52±2.04 vs. 1.00±0.22) 顯著高于對照組（P lt;0.05）; 實時RT-PCR提示：實驗組αSMA、骨鈣素、骨橋蛋白、核心結合因子等表達均較對照組明顯升高（P lt;0.05）。 結論 體外誘導鈣化的瓣膜間質細胞呈現相對激活狀態，表型向收縮表型和成骨表型轉化，可能為瓣膜鈣化的病理基礎。
引用本文： 陳思,董念國,史嘉瑋. 主動脈瓣膜間質細胞體外誘導鈣化的實驗研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2010, 17(5): 385-389. doi: 復制