摘要: 目的 通過分析風濕性心臟病二尖瓣狹窄患者心房肌組織超級化激活環核苷酸調控通道基因家族4(HCN4)基因表達與心房顫動發生
的關系,為探討心房顫動發生的機制奠定理論基礎。 方法 52例風濕性二尖瓣狹窄患者,根據是否合并心房顫動將其分為兩組,實驗組:38例,男18例,女20例;年齡26~68歲,平均年齡46.47歲;均合并心房顫動。對照組:14例,男6例,女8例;年齡21~62歲,平均年齡42.93歲;不合并心房顫動。提取并逆轉錄兩組患者心房肌組織中HCN4基因的總核糖核酸(RNA),應用SYBR GreenⅠ熒光染料, 建立檢測 HCN4基因信使RNA(mRNA)的實時熒光定量聚合酶鏈反應 (PCR)法,并對PCR產物測序進行分析。根據標準曲線計算出兩組心房肌組織中HCN4基因 mRNA含量,并以HCN4基因mRNA和內參β肌動蛋白(β-actin)含量的比值作為評價HCN4基因mRNA表達水平指標。 結果 測定HCN4基因cDNA 序列同源性為100%。建立的實時熒光定量 PCR方法在103~107拷貝數/μl的標準品梯度稀釋范圍內r為0.999。實驗組HCN4基因mRNA與β-actin含量的相對表達值比值與對照組比較明顯升高(1.323±1.226 vs. 0.116±0.192,P<0.05)。 結論 實時熒光定量PCR對HCN4基因mRNA能進行準確定量,HCN4基因的過度轉錄表達提示其可能參與了調控風濕性二尖瓣狹窄心房顫動的發生過程。
引用本文: 楊濤,周華富,冼磊,等. 風濕性二尖瓣狹窄心房顫動患者HCN4基因cDNA序列測定及mRNA的表達. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2010, 17(2): 171-173. doi: 復制