• 哈爾濱醫科大學第二附屬醫院呼吸內科(黑龍江哈爾濱 150086)通訊作者:吳曉梅,E-mail:wxm_doctor@163.com;
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目的  通過觀察外源性骨髓間充質干細胞(MSC)的肺臟遷移及分化情況,探討MSC治療肺纖維化的細胞學機制。
方法  體外分離、培養雄性Wister大鼠的MSC。將60只雌性Wistar大鼠隨機分為4組,A組制備博萊霉素致肺纖維化模型;B組和C組分別于博萊霉素注射后,立即和7 d后通過尾靜脈注入5-溴-2-脫氧尿苷(BrdU)標記的雄鼠MSC液0.5 mL(含細胞數2.5×106個);D組造模后,立即注入未標記的等量雄鼠MSC液,作為陰性對照。提取肺組織的DNA,通過聚合酶鏈反應(PCR)檢測雄性鼠的性別決定基因(sry基因),以判斷外源性MSC是否存在于雌性鼠肺組織中;留取肺組織、新鮮提取的骨髓干細胞和培養至第5代的MSC行BrdU和肺表面活性蛋白C(SP-C)的雙重免疫熒光染色,通過逆轉錄PCR(RT-PCR)檢測其是否表達SP-C mRNA和水通道蛋白5(AQP-5)的mRNA,觀察MSC移植前后的分化情況。
結果  造模后立即和7 d后移入雄性MSC的雌性鼠肺組織均可表達sry基因,且肺組織中的MSC可轉化為Ⅱ型肺泡上皮細胞(AECⅡ),并具備AECⅡ的形態學特征和分子生物學表型,但立即移入組明顯好于7 d后移入組(P lt;0.01)。新提取的骨髓干細胞和培養至第5代的MSC表達SP-C mRNA,而不表達AQP-5 mRNA,且SP-C的免疫熒光染色陰性。
結論  外源性MSC可移入到損傷的肺組織內并轉化為AECⅡ,而且早期移入更顯著。這種分化潛能在骨髓階段已具備,但要到損傷的微環境下才能發生轉化。

引用本文: 黃坤,吳曉梅,王欣燕,康小文,肖金玲,李兆國. 骨髓間質干細胞向肺泡細胞轉化的實驗研究. 中國呼吸與危重監護雜志, 2011, 10(6): 572-576. doi: 復制